翟明，王祥润，吴漫婷，林大都，李俊芳，李兰芳

(嘉应学院医学院，广东 梅州 514031)

药用植物标本是在没有新鲜植物的情况下供辨认、教学、参观等的最理想资料。目前,应用最广泛的实物标本是腊叶标本、浸制标本、覆膜标本和树脂标本。其中，腊叶标本又称压制标本，供教学和研究使用,腊叶标本操作简便,成本低且环保,易于查阅和携带,应用范围最广,是资源普查的主要实物标本[1]。为确保标本的完整性和美观性，腊叶标本的制作过称尤为重要。其他研究者[2-5]也总结了植物标本制作的研究概况及制作方法，但未按植物特性具体区分，本研究是根据全国第四次中药资源普查—广东省梅县区、大埔县、兴宁市、梅江区四个县市区的普查工作，积累了大量药用植物标本详细制作的经验，以期为后续蜡叶标本的规范化制作提供参考。

1 植物的采集

在外出采集植物前，需提前规划好本次工作的路 线和时间，安排并准备好必须的物品，如干粮、水、便药、铅笔、记录本、标本袋、枝剪、照相机等。采集前要先拍照，植物的照片要包括其单独的整体照片、具有辨认特征的局部照片及其生长环境的照片。采集标本时，选择无虫蛀、生长状态良好的植株，并尽量采集能代表该植物本身形态特征的完整标本，如植物的花、果实、种子等。每一个物种采集3～5份标本，防止制作过程中损坏而无法弥补，但对于野外珍稀物种，一般只取一株或只拍照不采集。不同类别的植物的采集见表1。有些植物的特殊器官也是分类鉴定时的重要依据,如百合科、兰科、天南星科、石蒜科等某些药用植物的地下部分,寄生药用植物的寄主,蕨类药用植物应采集地下部分、营养叶、孢子叶及具有孢子囊群和孢子的植株[6]。

表1 不同类别的植物的采集及实时记录

2 植物的修剪及清洗

清洗植物时主要洗去植物根部的泥沙和叶子上的虫卵等杂物，清洗时动作要轻柔，防止叶子、花、果实的部位脱落，根部泥沙难以清洗时可用刷子轻轻将泥沙刷掉，清洗完毕后用吸水纸将植株上残留的水分吸干。修剪的原则是保留植株的主要辨认特征，并且使之美观，植物的大小可根据台纸的大小进行修剪，叶子较多可根据实际情况修剪去一部分叶子，花、果实等的修剪亦是如此。

3 植物的压制

标本压制的一般步骤为：(1)在标本夹上铺上一层瓦楞板和3～4层吸水纸后，将标本平铺在吸水纸上展开。(2)标本的叶子应确保有正反两面，一般只需反2～4片叶子即可。(3)压制时尽量将根、叶子、花、果实等展开压制，尽量不要重叠，以免影响鉴定。若是某一部位太高，可用硬纸板将植株整体垫高。(4)如果植株过大，可以折成“N”形或“V”形，也可以剪成上、中、下三段，然后进行拼接，但不能破坏植株的主要辨认特征[7]。一份标本压制完毕后，在其上方铺3～4张吸水纸，重复以上操作，最后盖上瓦楞板和标本夹，用绳子绑紧。

压制时应根据植物不同器官的实际情况采用不同的压制方法。如植物叶片的质地包括革质、纸质、草质、膜质和肉质，其中革质和纸质叶片质地较硬，需要用硬纸板先将叶片固定，再铺3～4层吸水纸，防止叶片干燥后失水翘起，容易损坏和影响美观；草质、膜质叶片质地较柔软，无需用硬纸板压制，可直接铺上吸水纸；需要特别注意的是，肉质叶片含水量较高，其压制和干燥必须单独进行，以免其自身水分干燥不完全而损坏其他标本。但对于含水量较多的果实、种子等，应做好标记后与标本分开干燥，以免干燥不完全，植物不同器官的压制方法见表2,不同质地的植物叶片压制方法见表3。

表2 不同种类植物器官的压制

表3 不同质地的植物叶片的压制

4 标本的干燥与保色

目前改良的标本干燥保色方法有电熨斗熨烫快速干燥保色法、微波干燥保色法、烘箱干燥保色法、低温脱水干燥保色法、硫酸铜试剂法等。其中使用较多的是烘箱干燥法，该方法相比于其他方法而言操作简单，可同时干燥多份标本，且可以控制温度和时间；但由于不同质地的叶片干燥的时间和温度不同，需要分批烘干，一般使用的温度是45 ℃，20～26 h；此方法对革质和肉质叶片的保色效果较差。目前保色效果较好的是硫酸铜试剂法，叶绿体卟啉环中的镁原子可被铜离子、锌离子等金属离子置换，若铜离子置换叶绿素中镁离子，则使叶片内形成性质稳定的深绿色，这是硫酸铜试剂法的主要原理[8]，该方法保色效果较明显，适用于革质、纸质叶片的保色，但是不适用于膜质、草质叶片的保色，因为叶片经浸泡煮制后变软，像苎麻等表面有柔毛的叶片，捞出后叶片还会紧贴在一起，很难再将其展开；另外，该方法保色速度慢，适用于实验室或者数目较小的标本保色，不适于大量标本的保色。不同植物标本干燥保色方法比较研究。孙立娇[9]等通过对紫花药用植物腊叶标本的保色研究，提出经保色处理后的植物标本有利于长期保存。本研究也尝试过不同方法处理植物，比较不同方法的保色优缺点。如表4。

表4 常用的植物标本干燥保色法

5 标本修剪及上台纸

标本上台纸前必须进行修剪，尽量将植物的各个器官平展，修剪大小以适应台纸大小，且边缘留约1 cm。将标本置于台纸(40 cm×30 cm)的光滑面，调整到适当位置，左上角和右下角应留有空余的地方以便贴上记录签(13 cm×9 cm)和鉴定签(10 cm×7.5 cm)，粘贴时在鉴定签的右下角和记录签的左上角涂上适量白乳胶，与台纸的右下角和左上角相应边角对齐后进行粘贴，不可超出台纸，左下角和右上角分别盖上省章和县章。缝制标本时一般采用胶粘装订法(白乳胶)和细线装订法(细棉线)，标本的根茎用棉线固定，一般采用三针固定，根、茎、花各一针，枝条多的标本也可以多固定几针，尽量用植物的根茎将针孔遮住，以保证标本的美观[10]；叶片、花、果实等可用白乳胶固定，需将整个叶片或花瓣涂满一层白乳胶，防止叶缘和花瓣边缘翘起，但需特别注意的是，胶水不可涂太厚，否则会导致台纸弯曲；叶片尽量不要相互遮挡，影响鉴定；标本粘贴完毕后在枝条上绑上挂签(如图1所示)；另外，烘干或容易掉落的果实、种子可用密封袋保存，固定于该标本右侧。

图1 药用植物蜡叶标本图

6 标本的鉴定

标本上台纸后需进行鉴定、核对学名，对其进行分科、分属、分种，这是至关重要的一步，关乎该植物标本的准确性，参照中国植物志、广东植物志等植物工具书，由具有植物学专业的老师进行鉴定，每份标本至少经不同人鉴定2次。除对照实物标本外，必要时需结合采集时拍的植物图片，认真核对每一种植物的信息，鉴定完毕后打印出鉴定签(10 cm×7.5 cm)，在鉴定签的右侧涂上白乳胶贴于标本右下角。此处不能完全贴住，以防止标本鉴别有误，可再次鉴定后补更正后的鉴定签，与鉴定签对齐，从右往左对齐。为了保护标本的完整，一般鉴定后需放置一层硫酸纸以减少标本与外界环境的接触：在硫酸纸左边边缘位置涂上适量白乳胶粘于台纸背面，再将硫酸纸折回台纸正面，可对标本起保护作用。

7 标本的拍照

蜡叶标本的电子信息存储对科研、教师、学生的的随时检索、查询提供了极大的方便，因此，所有蜡叶标本的制作完成后对标本的及时拍照亦十分重要。腊叶标本进行拍照前，需检查该标本是否合格：检查有无采集签、鉴定签、挂签、县章、省章和标本是否完整等。拍照时需特别注意：(1)在标本左侧放标尺，将标本摆放平整，尽量不留下阴影，挂签不可挡住标本。(2)腊叶标本充满画面，多余的区域裁掉。(3)灯光明暗一致，可使用灯管四面打光。(4)照片边缘整齐，标本清晰。(5)相机像素为1 000万。拍照完成后进行后期处理：将照片上的阴影、斑点和杂质去除以及将照片多余区域裁掉。

8 标本的保存

腊叶标本制作完毕后，需对其进行一系列措施用以防止虫蛀和发霉，这也是标本保色中至关重要的一步，空气中的水分、氧气、还有光线等因素都会加速叶片变色的速度。将标本置于密封袋中，放入干燥剂和樟脑丸防潮防虫，后挤出密封袋中的空气，但不可用真空机防止标本变形，在密封箱中加入变色硅胶或铺一层生石灰，盖上瓦楞板后将密封袋放入密封箱中，密封后在空调低温下保存。将制作好的标本进行整理，按植物分类等级进行排列，本研究中的腊叶标本按照恩格勒系统排序置于箱中有序保存，外箱侧面贴上所存标本目录,如图1。温带娣[11]，李志奇[12]等用氰化钾、臭氧熏或低温储藏方式仅适用于少量标本短期内存放，除此之外，需隔一段时间开箱检查变色硅胶或生石灰是否需要更换和标本是否虫蛀发霉。

9 讨论

腊叶标本的制作研究过程仍需每一位普查队员和专业人士的改进，以便标本的长期保存，为其研究、教学提供极大帮助。如膜质、草质叶片和植物的花沾水容易皱缩，果实、种子等沾水后不易干燥，甚至容易发生霉变，故清洗时尽量避开这些器官。压制标本时需要时刻压紧，以免叶片发生重叠。通过硫酸铜试剂法进行标本保色过程中，可用温度计维持溶液的温度，并随时观察叶片颜色变化，避免加热用烘箱干燥标本时，应注意干燥时间和温度，避免标本过度失水或者干燥不完全，可采用计时开关控制干燥时间，定时检查标本干燥程度。标本制作完毕后，若发现标本霉变，可用酒精轻轻擦拭。在蜡叶标本拍照过程中，若出现光线不均的现象，在翻拍台上置一块透明的玻璃，可基本去除阴影，大大的提高拍照的效率。

10 总结

蜡叶标本的规范化制作是一项细致的工作，要求所有参与过的人员都必须耐心、细致，处理好每一个过程。一份完美的蜡叶标本也体现了团队的合作精神和专业化水平。本研究是基于全国第四次中药资源普查队梅江区、梅县区和大埔区资源调查过程中对植物腊叶标本的主要研究内容，腊叶标本制作过程的每一步都要细细把关，需要极大的耐心和细心才能保证最终标本的美观和完整。采集尽量保证植株的完整，尽量采集处于花期果期的植物；清洗修剪要耐心，将泥沙和虫卵全部清除，保证标本美观及完整性；压制需注意不同植物采取不同的压制方法，并及时做好记录；确保标本完全干燥后，才能上台纸；标本制作完成后，需要密封保存，并经常查看有无发霉虫蛀。