温红珠，戴小玲，林江

(上海中医药大学附属龙华医院，上海 200032)

溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种慢性自身免疫性疾病，以腹痛、腹泻、黏液脓血便为主要临床表现；属于炎症性肠病(Inflammatory bowel disease，IBD)的一种。随着社会经济的发展，人们饮食结构及生活习惯的改变，UC的发病率逐年上升。研究者预测至2025年，中国IBD患者人数将达到150万人[1]。UC迁延难愈，世界卫生组织将其定为难治性疾病。清肠栓是上海中医药大学附属龙华医院的院内制剂，具有清热除湿，活血化瘀止血的功效，主要由青黛、三七、马齿苋等药物组成。前期研究表明清肠栓治疗轻中度UC的临床有效率高达91.49%[2]，最近的机制研究[3]发现清肠栓治疗UC与下调肠道TLR4表达，抑制NF-κB 活化有关。本实验通过葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium, DSS)造模大鼠粪菌液灌肠以及菌株体外培养的方法，探讨清肠栓对于紊乱肠道菌群是否有直接调节作用，并探讨其与NF-κB通路的关系。

1 实验材料

1.1 菌株

两歧双歧杆菌(编号：1.5029)和多形拟杆菌(编号：1.5132)，购自中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)。

1.2 实验动物

健康雄性SPF级Sprague-Dawley大鼠24只，4～6周龄，体质量(200±20)g，购自上海斯莱克实验动物有限责任公司，合格证编号为SCXK(沪)2017-0005。饲养于复旦大学实验动物科部SPF级动物房。

1.3 实验药物

DSS购自MP公司，分子质量:36 000～50 000，产品货号:160110。清肠栓组方煎剂主要组成：马齿苋、五倍子、青黛、三七。由龙华医院药剂科提供，高压蒸汽灭菌后备用。模型粪菌液：将DSS造模成功大鼠新鲜粪便置于无菌药碗中，根据相关参考文献[4]按照1∶6(W∶V)的比例加入无菌0.9%生理盐水进行初步均质加工；……