杨晨 邓嘉慧 陈佩虹 丁清龙 陈丹霞 周露

（广东省食品检验所 广东广州 510435）

1 前言

截至2018年，转基因作物的商业化种植已持续23年，全球种植面积为1.917亿hm2。其中，转基因大豆的种植面积占50%，耐除草剂大豆GTS40-3-2（抗草甘膦转基因大豆）是获得批准种植的转基因作物转化体[1-3]。我国作为转基因大豆进口大国，对于转基因大豆食品的监管应需要逐步加强。根据《食品安全法》第六十九条规定：“生产经营转基因食品应当按照规定显著标示。”急需稳定可靠、易于推广的定量检测方法[4-6]。

微滴式数字PCR（Droplet Digital PCR，ddPCR）是第三代PCR（Polymerase Chain Reaction）技术，可以实现绝对定量分析。相较于传统PCR及qPCR（Realtime fluorescence quantitative PCR，qPCR），ddPCR可以实现单分子分析，不依赖于扩增曲线的循环阈值（cyclethreshold，Ct）进行定量，且不依赖于扩增效率及标准曲线，已在食品掺假鉴别、转基因成分分析等领域应用[7-9]。但其所用仪器较为昂贵，试剂成本较高，且检测成分复杂、未知成分的食品时，需要耗费较高的成本，一定程度上限制了该技术的应用与推广[10-15]。qPCR也能很好满足常规样品的转基因检测需求，日常检验成本比ddPCR更具有优势。

本文通过ddPCR与qPCR法，对日常大豆样品进行转基因项目检测，旨在比较2种方法的优缺点，为日常样品的转基因成分检测探索多种检测方案，也为其他转基因产品的定量分析提供参考。

2 材料与方法

2.1 实验材料

大豆转基因成分（阴性）样品、GTS-40-3-2品系大豆样品（中国检验检疫科学研究院测试评价中心）；市售大豆样品10份。

扩增引物及探针由生工生物工程（上海）股份有限公司负责合成，其序列参考GB/T 33526-2017[16]、GB/T 38132-2019[17]和SN/T 1204-2016[18]。……