付强 郭妍婷 陈俊贞 王金泉 史慧君

（新疆农业大学动物医学学院，乌鲁木齐 830052）

牛病毒性腹泻病毒（bovine viral diarrhea virus，BVDV）是导致牛病毒性腹泻（bovine viral diarrhea，BVD）的病原［1］。牛、羊、鹿等易感动物感染BVDV后，会造成腹泻、急和慢性黏膜病、病毒血症、免疫耐受和持续感染、免疫抑制、繁殖障碍等症状［2］，是严重危害我国养殖业的重要传染病之一。国际兽疫局（Office International Des Epizooties，OIE）将BVD定为B类传染病，在我国进出口检验检疫中也将其列为二类传染病。

BVDV的非结构蛋白p7，位于E2蛋白与NS2蛋白之间，分子量约7 kD，是主要由疏水氨基酸构成的一个小分子肽［3］。由Harada和Carrere-Kremer等人最初提出BVDV和HCV的p7蛋白寡聚并形成离子通道［4］。因为p7的离子通道活性使其被纳入在病毒孔蛋白（Viroporin）家族中，Viroporin是一种小的疏水蛋白，当这些蛋白质在宿主细胞膜中寡聚时，它们会形成亲水孔，增加膜的通透性，进行离子和小分子运动，破坏细胞的许多生理特性［5-6］。大量研究发现，许多的病毒能表达膜蛋白结构，表现出细胞的离子通道样的某些功能，以介导病毒进入细胞、帮助病毒复制和调节病毒释放［7］。目前，针对BVDV p7的研究较少，p7寡聚形成离子孔道的机理尚不明确，抗p7抗体是开展研究工作的必要工具。本试验通过合成p7蛋白的抗原表位多肽，免疫动物后获取多克隆抗体，为进一步探索BVDV致病机制提供了有利工具。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞、病毒和动物 MDBK细胞购自上海细胞库；BVDV毒株NADL为国际标准毒株，购自中国药品监察所；新西兰大白兔，体重约2.5-3.0 kg，购自陕西西咸新区沣东新城实验动物养殖场。……