冯 程

(常德职业技术学院，湖南 常德 415000)

MicroRNA是一类由内源基因编码的长度约为22个核苷酸的非编码单链RNA分子，它们在动植物中参与转录后基因表达调控，对人体生长、发育、生理和病理等过程具有重要作用。因此microRNA的特异性识别和定量检测对于基础性研究和临床诊断都是极其有意义的。本实验根据鲁米诺及石墨烯量子点的ECL反应机理，设计了以二硫化钨纳米片为感应平台的生物传感器，实现了对microRNA的双组份检测。首先利用二硫化钨纳米片对碱基数约为22的DNA单链的特异性吸附作用将标记了鲁米诺与石墨烯量子点的单链DNA吸附在滴有二硫化钨的电极表面，该两种单链DNA便吸附在了电极表面。此时由于WS2对鲁米诺和石墨烯量子点具有ECL增强作用，得到了一个较高的ECL信号。当加入目标物microRNA时，microRNA与单链DNA杂交形成双链离开电极表面，WS2不能增强其发光，得到了一个较低的ECL信号[1-3]。根据以上原理得到的ECL信号变化与两种目标物的浓度成一定的线性关系从而达到了同时检测两种microRNA的目的。随着对microRNA的深入研究以及microRNA在疾病诊断的生物学标记和药靶中作用的日益突出，该生物传感器可能会给人类疾病的治疗提供一个新的发展平台[4-5]。

1 实 验

1.1 仪器与试剂

MPI-A型毛细管电泳电化学发光检测仪；CHI610A型电化学工作站；FA-2004A FA/JA系列电子天平；SB-80超声清洗机；TGL-20M高速台式冷冻离心机；移液枪；三电极体系：玻碳电极(GCE，Φ=4 mm)及其修饰电极为工作电极，饱和甘汞电极为参比电极，铂电极为对电极；……