单雪峰,马松峰(新疆医科大学第一附属医院小儿心胸外科,乌鲁木齐 830011;通讯作者,E-mail:masongfeng2@163.com)

先天性心脏病(congenital heart disease, CHD)是常见的先天出生缺陷,不仅占我国出生缺陷发生原因的第1位(占26.7%),也是发生率增长最快的出生缺陷[1,2]。简单先心病已经可以通过外科手术得到根治,但是复杂先心病的治疗仍然是需要突破和攻克的医学领域[3,4]。双向格林(Glenn)手术是复杂先心病中单心室途径的最常用术式,该手术方式已经明确,但在是否同时结扎或不结扎主肺动脉上仍有争论[5]。因此,本研究建立幼兔双向Glenn分流术的动物模型,探索双向Glenn手术后肺动脉前向血流(anterior pulmonary blood flow, APBF)对肺血管内皮功能的影响,以初步探讨和明确Glenn术中如何处理主肺动脉,进而为手术方案的设计提供更多研究数据和理论支持。

1 资料与方法

1.1 实验动物

实验所用新西兰幼兔30只(4周龄),平均体质量(352±11.36)g,购自新疆医科大学实验动物中心,研究通过了新疆医科大学第一附属医院伦理委员会审批(批准文号:IACUC201605-K3)。

1.2 材料

免疫组化SP法(DBA试剂盒:中国,武汉富鑫远科技有限公司);抗体:内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS,美国,Santa Cruz)、弹力蛋白(美国,Cell Signaling Technology公司)、内皮素-1(endothelin-1, ET-1,美国,Cell Signaling Technology公司);RIPA(Radio Immunoprecipitation Assay)细胞裂解液(美国,Sigma公司);超声破碎仪(美国,Cole-Parmer公司);BCA蛋白浓度测定试剂盒(美国,Sigma公司)。

1.3 双向Glenn分流术模型建立

麻醉及术前准备:首先肌肉注射氯胺酮(5-10 mg/kg),然后缓慢静脉推注地西泮(0.5-1.0 mg/kg),此后根据幼兔镇静情况或在强刺激操作前静脉推注100 g/L水合氯醛30-50 μl。麻醉完成后,建立静脉通道,备皮,连接心电监护。双向Glenn分流术模型手术过程如下:兔右侧卧位,垫高胸廓,经左前外侧第3肋间进胸,剪开胸膜,暴露肺脏。……