杨子茵,黄 军,李佳宇,曹 西,倪 艳,高安亮(成都医学院第二附属医院核工业四一六医院神经外科,成都 610051;通讯作者,E-mail:3034240438@qq.com)

癫痫作为一种常见的反复发作的顽固性疾病,其发作机制涉及突触结构、细胞死亡、神经信号传导及炎症[1,2]。研究发现,目前所用抗癫痫药物对60%的患者有效,40%患者疗效不佳,因此寻找有效的治疗方法对提高抗癫痫发作效果与生存质量极其重要[1]。微小RNA作为一个小型非编码RNA家族可通过抑制其靶基因mRNA表达及翻译来调控多种蛋白质的表达[2]。微小RNA 27b(miR-27b)与脑损伤大鼠神经细胞的凋亡密切相关,降低其表达可有效改善脑损伤,除此之外miR-27b-3p与神经退行性疾病多系统萎缩症的发生有关[3,4]。

自噬在维持细胞稳态中起重要作用,研究发现其在癫痫应激下可起到保护作用[5]。PTEN诱导性激酶蛋白1(PTEN-induced putative kinase 1,PINK1)/E3泛素连接酶(E3 ubiquitin ligase,Parkin)是一条经典的自噬相关通路,其激活可改善脑损伤大鼠的神经元损伤[6]。研究发现在HeLa宫颈癌细胞系中,miR-27b对PINK1的翻译抑制作用可显著降低溶酶体对受损线粒体的自噬清除[7]。目前,关于miR-27b及PINK1/parkin通路在癫痫中机制研究还未清楚,因此,本研究通过探究miR-27b及PINK1/parkin通路在癫痫中的作用机制,以期为疾病新治疗靶点的寻找提供参考。

1 材料与方法

1.1 实验动物

从长春市亿斯实验动物技术有限责任公司购买80只SPF级SD大鼠(245-285 g),许可证:SCXK(吉)2016-0004,于正常12 h明暗交替环境中适应性饲养1周,期间自由饮水采食,实验前禁食12 h。

1.2 主要试剂

氯化锂(货号:0416-100G)购自南京森贝伽生物科技有限公司;HE染色试剂盒……