周兰兰,李铭杰,关则兵,朱秋花,刘亚楠,曾文彬,邱石球,高延民,王 宏(广东药科大学附属第一医院血液科,广州 510080)

急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)是造血系统的髓系原始细胞克隆性恶性增殖性疾病,常有发热、出血、贫血等临床表现,预后效果较差、生存率较低[1,2]。AML治疗主要以化疗为主,阿霉素(adriamycin,ADR)是重要化疗药物之一,可抑制DNA、RNA的合成,抗瘤谱较广,对多种肿瘤细胞具有杀灭作用,适用于急性白血病、粒细胞白血病等疾病的化疗,对急性髓系白血病HL-60细胞具有一定的杀伤作用[3,4],化疗过程中白血病细胞会产生一定的耐药性,导致化疗药物的化疗作用明显降低[5],因此探究白血病细胞耐药性的可能机制对于临床治疗AML具有重要意义。miRNA是广泛存在于人体的非编码小分子RNA,参与细胞的增殖、凋亡等过程,多项研究表明miRNA与白血病细胞的耐药性联系密切[6,7],miR-186是miRNA家族成员之一,在人AML患者血清中呈现低表达,朱娟等[8]研究发现上调miR-186表达可降低人AML细胞对ADR的耐药性。miR-186-5p是由miR-186前体形成的miRNA成熟体,但关于miR-186-5p对AML细胞ADR耐药性的影响机制报道较少[9]。中心体相关激酶2(centrosome-associated kinase 2,NEK2)具有调控纺锤体、染色体、中心体等功能,在细胞有丝分裂过程中发挥重要作用,与HL-60细胞的增殖及凋亡过程联系密切[10],本研究通过生物信息学分析发现miR-186-5p与NEK2存在结合位点,但miR-186-5p能否通过调控NEK2来影响AML细胞ADR耐药性尚不可知。因此本文通过构建HL-60 ADR耐药细胞,探究miR-186-5p对HL-60细胞的ADR耐药性及其作用机制。

1 材料与方法

1.1 细胞

人急性髓系白血病细胞HL-60(货号:BFN608006116)购于上海细胞库。……