陈自宏 陈 凯 谢琪敏

（1.保山学院 高黎贡山生物资源研究所；2.云南省高校滇西昆虫资源保护与利用重点实验室，云南 保山 678000）

绿僵菌（Metarhizium）一种在生防上应用较广泛的昆虫病原真菌[1]。绿僵菌生物制剂具有致病力强、易生产、持效期长、应用效果好、安全性好等优点，具有广阔的应用前景[2,3]。

利用绿僵菌来防治农林害虫的研究与实践已逾百年[4]，近年来对绿僵菌生防研究的报道较多[2,5]，但很多都是室内毒力测定效果很好，室外推广应用效果却受到自然环境因素的限制，故其真菌制剂的商品化进展十分缓慢[6]。昆虫病原真菌在实际应用过程中，田间自然环境因素难于人为控制，多种环境胁迫因子可影响真菌孢子萌发和菌丝生长，从而降低其杀虫毒力[7,8]。绿僵菌对逆境因素的耐受能力在种间、种内，甚至不同菌株间都存在较大差异[9]。绿僵菌菌剂研发中应选用耐逆性能优良的菌株，增加其生防制剂的防效稳定性。

本研究通过测定来自高黎贡山的不同绿僵菌菌株的耐逆性，筛选耐逆性好的优良菌株，为绿僵菌的田间应用提供优良的菌种资源。

1 材料与方法

1.1 材料

菌株：来自高黎贡山的绿僵菌菌株：BUM 2（海拔3 300 m）、BUM 2360（海拔2 360 m）、BUM 2600（海拔2 600 m）、BUM 225（海拔800 m）、BUM 66.1（海拔1 700 m），保存于保山学院真菌实验室。

1.2 耐盐性测定

将PPDA固体培养基配制成3个NaCl浓度梯度（0、0.3、0.6 mol/L），各菌株制备106个/mL的孢子悬液，分别取5 μL涂布接种于不同盐浓度培养基上，于25℃培养。设3次重复。

1.3 耐酸碱性测定

将PPDA固体培养基的pH值配制为3个梯度（5、7、10），各菌株制备106个/mL的孢子悬液，分别取5 μL涂布接种在不同pH梯度的培养基上，于25℃培养。……