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猫细小病毒VP2 基因克隆与生物信息学分析

2021-11-11郭明佳吴树康

中国动物检疫 2021年11期

姜 伟,郭明佳,吴树康

(龙口市动物疫病预防控制中心,山东省龙口市 265701)

猫细小病毒(feline parvovirus,FPV)又被称为猫泛白细胞减少症病毒(feline panleukopenia virus),是一种可以感染猫科、浣熊科及鼬科等多种动物的急性、致死性烈性传染病病原[1]。该病原主要通过带毒的粪便、尿液及口腔分泌物传播,可以导致感染动物出现体温升高、呕吐、腹泻及白细胞数量严重减少等多种临床症状,且小型猫科动物对其易感性最高[2]。

FPV 属于细小病毒科(Paroviridae)细小病毒属(Parvovrius),是无囊膜的单股正链DNA 病毒,其基因组主要有两个开放阅读框(open reading frame,ORF)组成,其中右侧ORF 编码重要的病毒结构蛋白——VP1 和VP2[3]。FPV 衣壳主要由VP2 结构蛋白组成,其含量可高达90%。同时,VP2 结构蛋白也是FPV 的主要抗原蛋白及受体结合蛋白,可以有效刺激机体产生针对FPV 的中和抗体并影响其致病性、宿主范围及血凝活性等多种生物学特性[4-5]。

因此,本研究通过对龙口市动物疫病预防控制中心分离保存的FPV 毒株(SD-01)VP2基因进行克隆及生物信息学分析,了解VP2 蛋白的分子特点及变异规律,以期为后续疫苗及诊断试剂盒研发提供参考及理论依据。

1 材料与方法

1.1 主要试剂

全基因组DNA 提取试剂盒(D1800)、质粒小量提取试剂盒(D1100),购自于北京索莱宝科技有限公司;DL 2 000 DNA Marker(3427A)、DH5α 感受态细胞(9057)、pMD18-T(6011),购自于宝生物工程(大连)有限公司;EasyTaqDNA Polymerase(AP111)酶,购自于北京全式金生物技术有限公司。

1.2 毒株

FPV 毒株(SD-01)由龙口市动物疫病预防控制中心从2021 年5 月山东省龙口市采集病料中分离鉴定及保存。

1.3 主要方法

1.3.1 引物设计与合成 参照GeneBank 中公布的FPV 全基……

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