miR-6886-5p通过调控LASP1表达抑制胃癌细胞的增殖和迁移
2021-11-06汤守元兰国玉黄耿朱钟钟李新明罗海平姜进平
汤守元 兰国玉 黄耿 朱钟钟 李新明 罗海平 姜进平
1 鄂东医疗集团黄石市中心医院(湖北理工学院附属医院)胃肠肛肠外科,湖北435000;2 鄂东医疗集团黄石市中心医院(湖北理工学院附属医院)泌尿外科,湖北435000
胃癌是消化道肿瘤中最常见的恶性肿瘤,具有较高的发病率和病死率[1]。胃癌早期症状并不明显,导致胃癌的早期诊断率较低[2]。阐明胃癌发生、发展的分子机制对寻找新的诊断标志物和治疗策略具有重要意义。微小RNA(miR)是一种内源性、非编码、单链小分子RNA,广泛表达于人体细胞[3]。miR通过抑制靶基因的表达,影响细胞的增殖、转移、凋亡、分化等功能[4]。越来越多的研究证明,miR在肿瘤的发生及发展过程起到关键作用[5]。miR-6886-5p是一个新发现的miR,其在肿瘤细胞中的表达和作用鲜有报道。2019 年10 月至2021 年1 月,本研究旨在检测胃癌细胞株中miR-6886-5p 的表达,探讨miR-6886-5p 对胃癌细胞增殖和迁移的影响以及其可能的作用机制。
1 材料与方法
1.1 细胞株与主要试剂 胎牛血清、DMEM 培养基、RPMI-1640培养基购于美国Gibco公司;胃癌细胞株和正常胃黏膜上皮细胞购于中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库;Lipofectamine 3000转染试剂、实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)试剂盒购于购自美国Invitrogen 公司;淋巴细胞增殖检测(MTS)试剂盒购于上海生工生物工程股份有限公司;双荧光素酶报告基因检测试剂盒购于美国Promega公司;LASP1 野 生 型(LASP1-WT)质 粒 及LASP1 突 变 型(LASP1-MT)质粒、miR-NC、miR-6886-5p 模拟物购于上海碧云天生物技术有限公司;所有抗体购于美国BD公司。
1.2 细胞培养和转染 在37 ℃、5% CO2培养箱中,HS-746T、SGC7901 和GES-1 细胞采用含10%胎牛血清DMEM 培养基培养,BGC823、MGC803采用含10%胎牛血清RPMI-1640 培养基培养。……
