王琦 武之绚 陈钟玲 吴白乙拉 胡宗福 牛化欣

（内蒙古民族大学动物科技学院，通辽 028000）

保持厌氧状态对青贮饲料的保存是至关重要的［1］。然而，在生产实践中，青贮饲料与氧气短期和长期接触是不可避免的［2］。由于氧气的渗透，青贮中存在的耐酸（兼性）好氧微生物开始增殖，氧化分解残余的糖、乳酸、乙酸和乙醇，作为生长的底物，发生有氧变质的起始阶段［2-3］。当形成的微生物量足够大时，氧化释放出的热量会引起温度的显著上升。随着pH值的增加，其他不耐酸的好氧微生物开始增殖，进入了有氧腐败阶段［4-5］。随着青贮饲料有氧暴露期间的不断变化，青贮菌群的组成也随之发生变化［6］。然而，目前对青贮饲料有氧暴露期间的菌群多样性研究较少［7］，缺少对有氧暴露青贮苜蓿菌群全面而又详细的了解。因此，本研究采用高通量二代测序对青贮苜蓿短、长期有氧暴露期间的菌群动态变化规律及其接种副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei）在有氧暴露期间所起到的作用，旨在为青贮苜蓿提高有氧暴露发酵品质提供科学依据和生产指导。

1 材料与方法

1.1 材料

紫花苜蓿取自内蒙古通辽市某草业公司，为第一茬开花初期。副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei LCP）由内蒙古民族大学肉牛营养与饲料高值化实验室筛选分离。培养细菌所用的MRS培养基、培养酵母、霉菌所用的马铃薯葡萄糖培养基购自G-CLONE（中国）。FastDNA SPIN Kit for Soil DNA提取试剂盒（MP Biomedicals，美国）。TransGen AP221-02 PCR扩增试剂盒（TransGen，中国）标准品（纯度≥99%）：乳酸、乙酸、丙酸、丁酸购自罗恩试剂。磷酸氢二钠、次氯酸钠、硫酸铵、葡萄糖购自光复。……