胡秀文 刘华 王宇 唐雪明，5 王金斌 曾海娟 蒋玮 李红

（1. 上海海洋大学食品学院，上海 201306；2. 上海农业科学院生物技术研究所，上海 201106；3. 兰州理工大学生命科学与工程学院，兰州730050；4. 上海市农业遗传育种重点实验室，上海 201106；5. 上海交通大学农业与生物学院，200240；6. 上海市农业科学院畜牧兽医研究所，上海 201106）

核酸检测技术在诊断感染、遗传疾病和癌症方面具有至关重要的作用，因此核酸检测技术得到了快速发展［1］。其中几种主要以PCR为基础的核酸检测技术已被用于病原体检测［2］，但需要昂贵的试剂和设备，以及熟练的人员。恒温扩增方法也被应用到核酸检测方面［3］，由于设备和应用技术的制约等因素，阻碍了核酸检测的现场速测应用［4］。因此开发灵敏、快速和特定的传感工具对于诊断检测至关重要。而目前发现的CRISPR-Cas（clustered regularly interspaced short palindromic repeats）系统基于其准确识别和切割特定DNA和RNA序列的能力，已被用于基因组编辑［5-6］，展示了其强大的分子检测潜在能力，成为了开发新的检测平台的热点。

CRISPR系统是细菌及古细菌利用Cas效应蛋白在crRNA引导下抵御外源核酸入侵的一种获得性免疫防御系统。研究人员在大肠杆菌基因组中发现具有重复DNA序列的的遗传结构，该结构是由CRISPR基因座，DNA靶向间隔序列以及编码crRNA（crispr RNA）组分和Cas蛋白操纵子的组分构成，称之为CRISPR-Cas系统［7］。它能将入侵的噬菌体、质粒和转座子的移动遗传元件（MGES）作为自己的间隔区序列，构成了细菌和古细菌适应性和遗传免疫的基础［8］。在自然条件下的CRISPR-Cas系统中，包括Cas12［9］、Cas13［10］和Cas14［11］及其同源物，会表现出间接的非特异性催化活性，可用于核酸检测，例如通过降解标记的核酸产生荧光信号［12］。……