妇康宁颗粒剂中黄芩苷含量测定方法的研究

2021-11-06陈少锋余兴华林嘉民花中卉

药品评价 2021年17期

陈少锋，余兴华,林嘉民，花中卉

厦门大学附属中山医院，福建厦门 361004

妇康宁颗粒剂原剂型为汤剂,是原厦门市湖滨南路厦门中山医院的临床常用经验方,属于院内制剂，由黄芩、黄芪、旱莲草、三七、五灵脂等多味中药材组成，具有补中益气、清热燥湿、止血凉血、活血化瘀、调经止痛之功效，多用于经期异常子宫出血、痛经血崩的治疗，能够有效改善经期腹痛，减少经期出血量，缩短经期出血时间，是一种疗效确切、安全可靠的纯中药制剂［1］。经研发醇提加水提的综合提取方法制粒可将汤剂改造为颗粒剂［2-4］，以更进一步方便患者临床使用。为保证妇康宁颗粒产品质量的可控性［5］，本研究根据文献资料报道［6-10］，建立妇康宁颗粒剂中所含的有效成分黄芩苷的HPLC 测定方法，并证实该方法具有操作简便、快捷、精密度和准确度高的优点，能够较好地控制妇康宁颗粒剂的质量，也为妇康宁颗粒剂的质量标准的优化提供科学的依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器

依利特p230 高效液相色谱仪；uv230+紫外-可见检测器；EC2000 色谱工作站；P230/P230p 高压恒流泵；KQ3200DB 型数控超声清洗器；BS2105S 型电子天平（北京赛多利斯天平有限公司）

1.2 试药

甲醇为色谱纯；双重蒸馏水；黄芩苷对照品（批号为10715-201117，供含量测定用，由中国药品生物制品检定所提供）。其他试剂均为分析纯。妇康宁颗粒剂供试品3 批，均由厦门大学附属中山医院药学部制剂室制备。

2 含量测定方法

2.1 色谱条件与系统适用性试验

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.4%磷酸（50∶50）为流动相，检测波长为275 nm；上述的色谱条件能够使黄芩苷色谱峰与其他组分色谱峰基本达到基线分离（分离度>1.5）,理论塔板数按参照物黄芩苷峰计算不小于3 000。

2.2 对照品溶液的制备

取黄芩苷对照品约10 mg，精密称定，并将其置于100 mL 量瓶中，加入甲醇溶解稀释至刻度，再使精密吸取1 mL 溶液至10 mL 量瓶中，加入甲醇稀释至刻度，摇匀，制成浓度为10 μg/mL 黄芩苷的对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备

取本供试品约1 g，精密称定，将其置于100 mL具塞锥形瓶中，使用移液管精密量取40 mL 的70%乙醇，加入具塞锥形瓶中，称定重量，置于微波超声仪中超声处理30 min，放置30 min～60 min 后待其冷却至室温后再称定重量，再加入70%乙醇补足损失的重量，充分摇匀后再使用微孔滤膜过滤，弃除初滤液，转用EP 管收集续滤液，精密吸取续滤液0.5 mL，将其置于25 mL 容量瓶，并使用70%乙醇稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。

2.4 测定法

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20 μL，注入液相色谱仪，测定，即得。

3 方法学考察

3.1 溶液的制备

3.1.1 对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品适量，置于10 mL 量瓶中，加入甲醇溶解摇匀后，再加入甲醇至刻度，即得浓度为0.263 mg/mL的对照品溶液。

3.1.2 供试品溶液的制备取本品粉末约1 g，精密称定，按“2.3 供试品溶液的制备”方法制备，即得。对照品溶液和供试品溶液的HPLC 色谱图分别见图1 和图2。

图1 标准品溶液HPLC色谱图

图2 供试品溶液HPLC色谱图

3.2 线性关系考察

精密吸取对照品溶液 0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mL至5 mL 棕色量瓶中，分别使用胶头滴管加入甲醇稀释至刻度。分别吸取20 μL，注入液相色谱仪进行分析，以峰面积对进样量（μg）作线性回归分析，试验结果表明，黄芩苷在5.26 μg/mL～26.30 μg/mL范围内呈良好的线性关系。回归方程为Y=60.075X+80.091，r=0.999 8，数据见表1。