李绪伦，任学毅

(重庆市食品药品检验检测研究院，重庆 401121)

青霉素V钾片可用于对青霉素敏感菌株所产生的轻、中度感染如扁桃体炎、咽喉炎、支气管炎、肺炎等疾病的治疗[1-2]。本研究拟按《中国药典》2020年版(四部)非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法、控制菌检查法进行适用性试验[3-4]，建立青霉素V钾片的微生物限度检查方法，供同行在工作中参考。

1 材料与仪器

青霉素V钾片[重庆科瑞制药(集团)有限公司，批号429001，规格0.236 g]；胰酪大豆胨液体培养基(批号190516)、胰酪大豆胨琼脂培养基(批号190504)、沙氏葡萄糖琼脂培养基(批号1904102)、麦康凯液体培养基(批号1903162)、麦康凯琼脂培养基(批号190510)均由北京三药科技开发公司提供；电子天平[梅特勒托利多仪器(上海)有限公司]；生化培养箱(重庆四达实验仪器公司)；高压蒸汽灭菌器(日本HIRAYAMA仪器制造公司)。

2 方法和结果

2.1 需氧菌、霉菌和酵母菌总数计数

2.1.1 菌液制备 取经35 ℃培养24 h的金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌液体培养物分别用0.9%无菌氯化钠溶液稀释成适宜浓度的菌悬液；取经25 ℃培养24 h的白色念珠菌液体培养物用0.9%无菌氯化钠溶液稀释成适宜浓度的菌悬液，作活菌计数备用。取经25 ℃培养6 d的黑曲霉菌斜面培养物，加入含0.05%(体积比)聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。吸出悬液(用管口带有薄无菌棉花或纱布能过滤菌丝的无菌毛细吸管)到无菌试管内，用0.9%无菌氯化钠溶液配成适宜浓度的孢子悬液，备用。

2.1.2 需氧菌总数计数 试验组：方法一，称取样品10 g，加入pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液到100 mL，混匀，静置30 min，吸取上清液作为1∶10的供试液[3]。……