超高效合相色谱法测定咖啡因含量实验设计
2021-11-05谢一凡姚莉韵严忠红蔡玉兴金玉杰李宁
谢一凡,姚莉韵,,*,严忠红,蔡玉兴,金玉杰,李宁
1上海交通大学医学院,基础医学实验教学中心,上海 200025
2上海交通大学医学院,药物化学与生物信息学中心,上海 200025
咖啡因(caffeine)是从茶叶、咖啡果中提取出来的一种黄嘌呤生物碱[1],化学名为1,3,7-三甲基黄嘌呤,属于一类中枢神经兴奋剂,适量食用有助于提神、去疲劳,因此含有咖啡因成分的能量饮料十分畅销。但由于咖啡因具有刺激中枢神经的功能,长期或过量食用对人体有害且易成瘾。因此对饮料中咖啡因含量快速、准确的测定,有助于人们科学合理地摄入相关产品。
用于检测咖啡因的分析仪器有多种,目前报道的主要有紫外光谱法、气相色谱-质谱联用法(GC-MS)、高效液相色谱法(HPLC)及液相色谱串联质谱法(LC-MS)[2–4]等,这些方法检测时间均较长,而且在样品前处理中,都需要使用较多有机溶剂,对环境和和操作人员健康不利。
超高效合相色谱法(Ultra Performance Convergence Chromatography,UPCC或UPC2)利用超临界二氧化碳(CO2)与少量有机溶剂(甲醇、乙醇等)为流动相,通过调节有机溶剂的比例及系统反压,使流动相的极性和密度发生变化,从而控制样品的分离效果。其优点是用无毒的CO2代替了有毒的挥发性有机溶剂,不仅减少废液处理环节、节省成本,而且可降低对环境和实验人员健康的危害[5,6]。目前,许多色谱技术(如GC、HPLC、LC-MS等)已被广泛应用于生命科学研究及临床医学测试中,而UPC2作为一种新型色谱分离技术,不仅拓展了气相色谱、反相高效色谱技术的局限性,能完全代替正相色谱技术,而且具有快速、高效、绿色环保及分离能力强的优点[7]。……
