杜 康， 曹 勇， 刘 彪， 谢 磊， 郑慧军

(1.河南中医药大学， 郑州 430052；2.河南中医药大学第二附属医院神经外科，郑州 430052)

胶质瘤是颅内发病率最高的恶性肿瘤，主要治疗方式为手术、放化疗[1]，但患者5年生存率仍然较低，且副作用较大。已有报道，夏枯草对乳腺癌、甲状腺癌、食管癌等多种恶性肿瘤具有良好的治疗作用[2，3]，但对胶质瘤的治疗作用尚无研究。本实验拟考察夏枯草溶液对胶质瘤U87细胞增殖与凋亡的影响。本研究已通过河南中医药大学实验动物伦理委员会审查。

1 材料与方法

1.1 药物

夏枯草配方颗粒，购自四川新绿药业有限公司(5 g/盒)

1.2 肿瘤细胞及实验动物

胶质瘤U87细胞(以下简称瘤细胞)购自上海中国科学院细胞库。雄性小鼠裸鼠，4周龄，购自南京医科大学动物中心。实验前所有裸鼠(BALB/cA-nu)在无病毒(SPF)环境中饲养，室温为26 ℃～28 ℃(78～820F)，相对温度保持在40%～60%，每日约维持10 h光照，14 h无光的明暗周期，提供无菌食物和水(所有操作均在无菌条件下进行)。动物实验开始之前，将裸鼠(BALB/cA-nu)按体质量随机分为模型组、夏枯草低、中和高剂量组，在新的环境中饲养1周。

1.3 试剂

MEM培养基(博士德生物科技有限公司)；Phosphate Buffered Saline(Biological Industries)；胎牛血清(Biological Industries)；青链霉素双抗混合液(Beijing Solarbio)；CCK-8试剂盒(上海同仁化学科技有限公司)；凋亡试剂盒(凯基生物)；BCA蛋白测定盒(武汉博士德生物技术有限公司)；Bax、Bcl-2、Cleaved-Caspase-3、Cleaved-Caspase-9、Ki-67单克隆抗体均购自武汉三鹰生物技术有限公司；PCR逆转录试剂盒(大连宝生生物工程有限公司)；mRNA提取试剂盒(上海生工生物有限公司)；Bcl-2、Bax、Caspase-3及Caspase-9的引物均委托上海生工生物有限公司合成。……