刘静雯，黄 亮，班立桐，孙 宁，王 玉，杨 艳

（天津农学院农学与资源环境学院，天津 300384）

灵芝（Ganoderma lucidum）作为一种名贵中药用于临床已有悠久的历史，具有扶正固本[1]、滋补强壮、抗肿瘤[2]、抗放射、提高免疫力的功效。近年来关于灵芝产漆酶的研究越来越多[3]，与动物来源的漆酶相比，真菌漆酶具有更好的热稳定性、更强的金属耐受性及底物催化活性[4]。

与固体菌种相比，灵芝液体发酵培养周期短、工艺简便[5]。金属元素对真菌细胞生长、次生代谢产物合成具有显著影响。李宇伟等[6]研究表明，0．2%的Fe2+对提高灵芝多糖含量有明显效果。鲍锐等[7]研究结果表明，加入100μmol·L-1硫酸铜时，灵芝酸产量较对照组提高57%。蔡爱群等[8]发现在浓度为200 mg·L-1～1 200 mg·L-1时，随着 Ca2+浓度的增加，赤芝的生物量逐渐减少。

通过对灵芝菌株泰山灵芝G8的培养条件进行优化，考察 Fe2+、Cu2+、K+、Mg2+、Ca2+对菌株 G8 液体培养过程中产漆酶的影响，为灵芝的资源开发利用提供参考，促进药用真菌产业的发展。

1 材料与方法

1.1 菌种

灵芝菌株泰山灵芝G8（以下简称菌株G8），保藏于天津农学院食用菌研发中心。

1.2 培养基

液体菌种培养基：KH2PO40.46 g、K2HPO41 g、玉米粉1%、葡萄糖20 g、酵母浸粉15 g。

1.3 试验方法

1.3.1 菌丝生长曲线的测定。

接种后静置1 d，然后置于25℃、140 r·min-1的摇床培养。于第3天开始每天取样，记录菌丝干重。以培养时间为横坐标，菌丝干重为纵坐标绘制菌丝生长曲线，并根据生长曲线测定取样时间。

1.3.2 菌种培养条件筛选

1）静置时间对菌株G8液体培养速率的影响

在转速140 r·min-1条件下，设置不同静置时间梯度，依次为 0、8 h、16 h、24 h、32 h。培养7 d后，测定菌丝体干重。……