李云霞，柴美清，李 青，韩鹏远，张锁峰

（山西农业大学科研管理部，山西 太原 030031）

马鞍菌（Helvella elastica）隶属于子囊菌门（Ascomyzcota）盘菌纲 （Discomycetes）盘菌目（Pezizales）马鞍菌科 （Helvellaceae）马鞍菌属（Helvella）[1]。因其菌盖呈马鞍状，故被称为马鞍菌。马鞍菌肉质细嫩，味道鲜美，营养丰富，具有提高人体免疫力、延缓衰老、防癌抗癌、预防糖尿病等功效，因此马鞍菌不仅是可食用的野生菌，更是子囊菌中的上乘之品[2-5]。

野生马鞍菌主要分布在欧洲、北美洲和亚洲等地区；在我国，马鞍菌主要分布在吉林、河北、山西、陕西、甘肃、青海、四川、江苏、浙江、江西、云南、海南、新疆、西藏等地[6-7]。在山西境内的管芩山、关帝山、霍山、五台山、太岳山等地均有分布[8-10]。近年来，由于人们对野生食用菌资源的追捧，导致马鞍菌市场需求量日益增加，也造成对马鞍菌的肆意乱采滥挖，不仅破坏了生态环境，而且数量急剧下降，致使马鞍菌逐年减少[11-12]。目前，关于马鞍菌的研究还比较欠缺，且主要集中在野生资源调查、子实体的营养价值、生理生化等方面，关于人工驯化栽培的研究不多，因此，开展马鞍菌资源的驯化栽培研究迫在眉睫。通过研究不同碳源对3个野生马鞍菌菌株菌丝生长的影响，旨在探索马鞍菌的营养生理特性，为马鞍菌的人工驯化栽培提供一定的参考依据。

1 材料与方法

1.1 试验时间与地点

试验于2020年在山西农业大学实验室内进行。

1.2 试验材料

1.2.1 菌株

试验菌株由课题组成员赴山西省太原市娄烦县、忻州市五台山采集，并在山西农业大学实验室内分离、纯化所得，菌株编号为M2、M6、M7。

1.2.2 培养基

基础培养基：马铃薯200 g、磷酸二氢钾2 g、硫酸镁1 g、蛋白胨4 g、葡萄糖10 g、琼脂粉20 g，去离子水1 000mL，pH自然。

1.3 试验过程

采用平板培养法观察并记录不同培养基上马鞍菌菌落的直径、颜色、长势、萌发时间、满皿时间、疏密程度、平均生长速率等情况，研究供试碳源对马鞍菌菌丝生长的影响。整个过程在（25±1）℃的恒温培养箱内进行。

1.4 试验方法

分别用等量的供试碳源代替基础培养基中的葡萄糖，以不加碳源为对照，研究不同碳源对马鞍菌菌丝生长的影响，每个处理重复5次。供试培养基碳源分别为葡萄糖、乳糖、可溶性淀粉、蔗糖、果糖、甘露醇、麦芽糖。

1.5 数据处理

菌丝长势的评分标准：菌丝长势浓密、均匀，5分；菌丝长势较浓密、较均匀，4分；菌丝长势较稀疏、较均匀，3分；菌丝长势较稀疏、不均匀，2分；菌丝长势稀疏、不均匀，1分。

菌丝生长指数（D）计算公式为：

式中：A为菌丝长势的评分；v为菌丝的生长速率（cm·d-1）。

试验数据采用Microsoft Excel 2003软件进行处理，SPSS软件进行显著性分析。

2 结果与分析

2.1 不同碳源对3个野生马鞍菌菌株菌丝生长的影响

不同碳源对3个野生马鞍菌菌株菌丝生长的影响详见表1和图1。

表1 不同碳源对3个野生马鞍菌菌株菌丝生长情况的影响Tab.1 Effectof different carbon sources on the growth ofmycelia of threewild strains of Helvella elastic

图1 不同碳源对3个野生马鞍菌菌株菌丝生长的影响Fig．1 Effectof different carbon sources on the growth ofmycelia of threewild strains of Helvella elastica

由表1和图1可以看出，3个野生马鞍菌菌株在7种碳源和对照培养基上均能生长，但菌丝生长情况各不相同。从菌丝颜色来看，有洁白、白、淡白3个等级，从菌丝密度来看，则从+到+++++共有5个等级，长势评分也从1分到5分，共有5个评分等级，这表明马鞍菌对碳源的利用是有选择性的。在7种供试碳源中，M2和M7马鞍菌在可溶性淀粉培养基上表现优异，菌丝颜色洁白、浓密、均匀，长势评分均达到了5分，在乳糖培养基上长势评分都只有1分；而M6马鞍菌在葡萄糖和乳糖培养基上表现相对较好，菌丝洁白、较浓密、均匀，长势评分4分，在果糖和甘露醇培养基上则菌丝淡白、稀疏，长势评分只有1分，说明不同的马鞍菌对碳源的选择不同。

2.2 不同碳源对3个野生马鞍菌菌株菌丝生长速率的影响

不同碳源对3个野生马鞍菌菌株菌丝生长速率的影响详见表2。

表2 不同碳源对3个野生马鞍菌菌株菌丝生长速率的影响Tab．2 Effectof different carbon sources on the growth rate ofmycelia of threewild strains of Helvella elastica

由表2可知，3个野生马鞍菌菌株在7种碳源培养基上的萌发天数、满皿天数、生长速率都不尽相同。马鞍菌菌株M6在接种后的0．5 d内均能萌发，6 d～7 d即可长满培养皿；而菌株M2和菌株M7则都需要1 d时间萌发，长满培养皿最快分别需要8 d和7 d，慢则需要16 d和18 d。3个野生马鞍菌菌株分别在甘露醇、乳糖、葡萄糖培养基上生长速度最快，分别达到了 1．17 cm·d-1、1．43 cm·d-1、1．23 cm·d-1；在乳糖、果糖和麦芽糖、乳糖培养基上菌丝生长的最慢，只有 0．52 cm·d-1、1．21 cm·d-1、0．50 cm·d-1。

在7种供试碳源中，马鞍菌菌株M2在甘露醇、麦芽糖培养基上生长较快，生长速度极显著高于果糖和乳糖；其次是可溶性淀粉、蔗糖、葡糖糖、CK。马鞍菌菌株M6在乳糖培养基上生长最快，生长速度极显著高于CK、葡萄糖、果糖和麦芽糖；其次是可溶性淀粉、蔗糖、甘露醇。马鞍菌菌株M7在葡萄糖培养基上生长最快，极显著高于蔗糖、乳糖；其次是可溶性淀粉、果糖、麦芽糖、甘露醇、CK。

2.3 不同碳源对3个野生马鞍菌菌株菌丝生长指数的影响

不同碳源对3个野生马鞍菌菌株菌丝生长指数的影响详见图2。

图2 不同碳源对马鞍菌菌丝生长指数的影响Fig.2 Effect of different carbon sources onmycelium growth index of Helvella elastica

由图2可知，3个野生马鞍菌菌株在7种碳源培养基上的菌丝生长指数各不相同。整体来看，3个野生马鞍菌菌株在葡萄糖、可溶性淀粉和麦芽糖培养基上的生长指数相对较高。对于不同马鞍菌菌株在同种培养基上的表现，除乳糖外，菌株M7的菌丝生长指数高于菌株M2和菌株M6。对于同种马鞍菌、不同的培养基，则表现为马鞍菌菌株M2在可溶性淀粉培养基上菌丝生长指数最高，为5.30，在乳糖培养基上生长指数最低，只有0.52，约为可溶性淀粉培养基上菌丝生长指数的1/10。马鞍菌菌株M6在乳糖培养基上生长指数最高，在果糖培养基上生长指数最低。马鞍菌菌株M7在葡萄糖培养基上生长指数最高，为6.14，在乳糖培养基上生长指数最低。

3 结论与讨论

碳源是微生物生长最重要的营养物质之一，可以为菌丝的生长提供必要的能量[13]。试验结果表明，3个野生马鞍菌菌株均可利用单糖、二糖、多糖及糖醇，说明马鞍菌的碳源利用范围非常广泛。这与羊肚菌 （Morchella spp.）[14-15]、白灵菇 （Pleurotus nebrodensis）[16]、钉子菇 （Tricholomamongolicum）[17]、花脸香蘑（Lepista sordida）[18]等其他食用菌的碳源吸收特点相似。但是，不同产地不同品种的马鞍菌在不同的碳源培养基上生长情况有很大不同，各个处理间差异较大，说明马鞍菌对碳源的利用也是有选择性的[19]。

试验中，3个野生马鞍菌菌株对7种碳源的选择各不相同，其中，马鞍菌菌株M2和菌株M7的最适碳源为可溶性淀粉，马鞍菌菌株M6的最适碳源为乳糖。这可能是由于供试菌株的品种和产地不同，遗传特性与基因表达上的差异所导致[20]。何培新[21]对河南省野生皱马鞍菌进行研究，结果显示，D-果糖、葡萄糖、麦芽糖为其菌丝生长的最适碳源，在淀粉培养基上菌丝生长一般。徐丽娜[22]对山西省野生棱柄马鞍菌进行研究，结果显示，葡萄糖为其菌丝生长的最适碳源，在淀粉培养基上长势最差，生长速度最慢。这体现了马鞍菌的遗传多样性，但也加大了其栽培驯化的难度[23]，这与李青等[14]及陶热等[24]在羊肚菌上的研究结果相似。

试验中，3个野生马鞍菌菌株的产地不同、品种不同，但是表现出对碳源的利用却相似。如马鞍菌菌株M2和菌株M7，在可溶性淀粉培养基上都表现优异，生长速度快、生长指数高，菌丝颜色洁白、浓密、均匀，长势评分均达到了5分，在乳糖培养基上都生长缓慢，长势评分低，生长指数低。而对于同种碳源培养基，不同野生马鞍菌的菌丝生长情况也可能是天壤之别。如在乳糖培养基上，马鞍菌菌株M6菌丝洁白、浓密、均匀，长势评分高，生长速度快，高达1.43 cm·d-1，而马鞍菌菌株M2和菌株M7菌丝生长速度慢，仅有0.52 cm·d-1和0.50 cm·d-1。因此，在实际生产中，应根据不同的马鞍菌菌株选择不同的碳源。

本试验仅研究了不同碳源对3个野生马鞍菌菌株菌丝生长的影响，对于不同氮源、不同碳氮比、不同温度、pH等其他相关的营养生理特性还有待进一步研究。