何婷婷 张瑞涛 史惠蓉 曹媛 冯巍 王文文 张微微

长链非编码RNA（long non-coding RNAs，lncRNAs）可在基因转录和转录后水平发挥重要的调节功能，参与细胞增殖、凋亡、转移、代谢、维持基因稳定性和化疗耐药等多种生理病理过程[1]，lncRNAs 与恶性肿瘤的发病密切相关。研究显示，在胃癌组织中可检测到长链非编码RNA PURPL（p53 upregulated regulator of p53 levels）的表达水平明显高于癌旁组织，且与肿瘤的直径、临床分期密切相关，提示PURPL 与胃癌患者预后不良相关[2]。本课题组前期研究了微小RNA-338-3p（microRNA-338-3p，miRNA-338-3p）及其靶基因MET 转录调节因子MACC1 表达异常与卵巢癌发生发展的关系[3]，ENCORI 数据库检索提示PURPL 可靶向调节miRNA-338-3p。目前，在卵巢上皮性癌（epithelial ovarian cancer，EOC）组织中的PURPL 表达鲜有报道，本研究旨在初步分析PURPL 在卵巢癌组织中的表达情况及其与卵巢癌患者预后的关系，为进一步研究PURPL 参与卵巢癌发病的分子机制奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 临床资料 收集2012年10月至20215年10月郑州大学第一附属医院105 例患者的临床病理资料，其中包括正常卵巢组织20 例、良性卵巢上皮性肿瘤组织20 例、EOC 组织65 例，年龄分别为（45～62）岁、（25～48）岁、（28～76）岁，中位年龄分别为51、39、50 岁。所有患者病例资料详见本课题组前期报道[4]。本研究经本院道德伦理委员会批准，并获得患者或家属知情同意。

1.1.2 主要试剂 组织RNA 提取试剂Trizol、cDNA-反转录试剂盒RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit、SYBR Green 荧光定量PCR 试剂盒分别购自美国Invitrogen、加拿大Fermentas、大连Takara 公司。

1.2 方法

1.2.1 医学数据库检索 选用开放医学数据库lnc-RNASNP2 和GEPIA 检索PURPL 在人类恶性肿瘤组织和配对的正常组织中的表达差异，使用Kaplan-Meier Plotter 数据库检索PURPL 与EOC 预后的关系。

1.2.2 实时荧光定量PCR 检测 组织总RNA 使用Trizol 提取，经纯化、定量、反转录，进而参照SYBR Green 荧光定量PCR 试剂盒说明书构建反应体系进行PCR 反应，以β-actin 作为内参。……