◆作者：辛国芹

◆单位：山东宝来利来生物工程股份有限公司，山东省动物微生态制剂重点实验室

脂肪酶（Lipase）可以将脂肪分解成脂肪酸以及丙三醇，是脂肪消化利用最基本的酶（闫昭明等，2021）。其可提高饲料中油脂的消化吸收率，促进机体健康。饲粮中添加300 mg/kg脂肪酶可改善京红蛋鸡产蛋后期肝脏的脂代谢，提高蛋鸡产蛋率，改善蛋壳品质和降低蛋黄胆固醇含量（彭箫等，2019）。吴先华等（2013）报道炎热的夏季,在母猪日粮中添加0.03%脂肪酶，减少脂肪粉的使用，可改善母猪体况及乳成分；龚俊勇等（2021）研究发现罗非鱼低脂日粮中添加100～200g/t脂肪酶可提高生长性能、血清生化及免疫指标。自然界中普遍存在脂肪酶（Konwar B K，2018)，微生物产生的脂肪酶具有来源广、生产期短、产量高、易提取、对外界环境要求低等特点（李唯一，2021）。

本研究旨在从林下土壤中通过平板筛选法筛选到一株产脂肪酶性能较好的菌株，并对其进行鉴定。为后续产脂肪酶菌株的选育及脂肪酶未来可能的工业化生产提供实践资料及科学依据，对脂肪酶的应用和发展具有重要的意义。

1 实验材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 分离源

泰山后山松树林下土，采用多点混合土样采集方法深度为2～10cm的土样。

1.1.2 培养基

分离平板培养基：三丁酸甘油酯平板（郭晓军等，2015）：蛋白胨10g，酵母粉5g，NaCl 10 g，三丁酸甘油酯2 mL，琼脂粉20g，水1000mL；

种子培养基：葡萄糖1.5%，蛋白胨1.0%、酵母膏0.5%，磷酸氢二钾0.12%，pH自然。

发酵培养基：葡萄糖2%，蛋白胨1.0%、酵母膏0.5%，磷酸二氢钾0.15%，硫酸镁0.01%，pH自然。

1.1.3 主要试剂（赵兴秀等，2016）

4%的聚乙烯醇（PVA）溶液：称取40g聚乙烯醇于烧杯中，加入800mL蒸馏水，边搅拌边加热，使其完全溶解，自然冷却后加蒸馏水定容至1000mL，然后用双层纱布过滤，保存滤液备用。……