胡广 关智宇 张开伟

(贵州中医药大学第一附属医院骨科，贵州 贵阳 550001)

骨质疏松是临床常见的骨科疾病，属于系统性代谢性疾病，主要以骨密度降低、骨量减少、固位结构退化等为表现特征〔1,2〕。女性骨质疏松发病率高于男性，且多发于中老年绝经后妇女，因此又被称为绝经后骨质疏松。绝经后骨质疏松与绝经后雌激素水平下降及生理性衰退等因素有关，是由多种因素导致骨重建速度降低、骨代谢失衡、骨微结构改变所致〔3,4〕。有研究表明，骨髓基质细胞增殖能力及分化成骨细胞能力在骨质疏松患者中明显下降〔5〕。作为调控成骨细胞、破骨细胞功能喜好通路网络中心，磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号对维持骨组动态平衡具有重要作用，而PI3K/Akt/糖原合成酶(GSK)3β/活化T细胞核因子(NFATc1)信号通路在破骨细胞分化、形成过程中具有重要意义〔6〕。miRNAs在骨质疏松中出现异常表达，但其是否能够有效控制成骨分化及骨骼形成，仍值得深究〔7〕。本研究通过PI3K/Akt/GSK3β/NFATc1通路观察沉默miR-664-3p对去卵巢骨质疏松大鼠的干预作用。

1 材料与方法

1.1材料 研究动物：选取30只健康SD雌大鼠，来源于北京微通利华实验动物技术有限公司。鼠龄8～13 w，平均鼠龄(10.5±3.1)w，体重228～267 g，平均体重(247.5±16.5)g。在相对温度(35±2)℃，湿度35%～45%，12 h光照昼夜交替照明环境下喂养1 w，给予标准鼠科动物饲料，不限制饮水与饮食。本文研究获得医院伦理委员会批准。

主要试剂：兔抗小鼠骨钙素抗体购自Dako公司；碱性磷酸酶(ALP)抗体购自碧云天公司；小鼠抗兔PI3K、Akt、GSK3β、NFATc1抗体购自BD公司；酶联免疫吸附试验试剂盒购自慧嘉生物；……