白燕 郭英 余宏鑫 王正煜 庞秋菊 贺凡 周庆元

(三二〇一医院呼吸与危重症医学科，陕西 汉中 723000)

非小细胞肺癌(NSCLC)是肺癌中最常见的组织学类型，约占肺癌总数的80%，其中约75%的患者发现时已经处于中晚期，是威胁人类健康的重大疾病之一，目前尚缺乏根治方法，5年生存率很低〔1,2〕。因此阐明NSCLC发生发展的机制，对改善非NSCLC的诊断方法和提高治疗效果意义重大。miRNA是一类内源性单链非编码小RNA分子，通过与靶基因的3′UTR结合，在转录后水平调控基因的表达，其异常表达与肿瘤的发生发展密切相关〔3～5〕。研究表明，miR-634在宫颈癌组织表达水平显著低于正常组织，miR-634可通过抑制mTOR的表达来抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭〔6〕；miR-634在肝癌组织和细胞中均为低表达，上调其水平可抑制肝癌细胞增殖、侵袭并诱导其凋亡〔7〕；miR-634在胶质瘤组织中表达下调，LncRNA DANCR在胶质瘤组织中表达升高，干扰 DANCR的表达调控miR-634的表达上调抑制胶质瘤细胞的增殖〔8〕。但miR-634在NSCLC细胞的增殖、凋亡的影响和具体分子机制目前还未见报道，因此本课题就miR-634在NSCLC中的表达情况及其对NSCLC细胞增殖、凋亡的影响和其具体机制展开研究，以期为NSCLC的早期诊断和治疗提供新的思路。

1 材料与方法

1.1材料 正常肺上皮细胞BEAS-2B和NSCLCA549、H1299、H1650细胞购自中科院上海生化细胞所细胞库；胎牛血清购自Gibco；1640培养基、胰蛋白酶购自Sigma；LipofectamineTM2000、Trizol总RNA抽提试剂购自Invitrogen；荧光定量试剂盒购自Roche；Western印迹用兔抗人CDCA5抗体购自Sigma Aldrich；CCK-8试剂购自Amresco；细胞凋亡试剂盒购自南京凯基公司。

1.2方法

1.2.1细胞培养采用含10%FBS、 160万U庆大霉素/ml的RPMI1640培养基培养细胞，并置于37℃、5%CO2、pH值7.2～7.4的无菌恒温培养箱中培养，选择对数生长期细胞进行后续实验。……