孙定军 梁中书 邢波 陈漠水 张福伟

(海口市人民医院(中南大学湘雅医学院附属海口医院)心血管内科，海南 海口 570208)

动脉粥样硬化(AS)是一种常见病，其发病率呈逐年增长趋势，对人类健康造成极大的威胁〔1〕。AS的发病机制十分复杂，是一个多因素、多阶段的病理过程。研究表明，氧化应激引起的血管内皮细胞结构损伤、内皮功能障碍等是AS发生的始动环节，抑制内皮细胞损伤对AS的治疗尤为重要〔2，3〕。CRNDE是一种长链非编码RNA(LncRNA)，与肿瘤等多种疾病的发生和发展密切相关，可作为疾病诊断的生物学标记物及治疗的分子靶点〔4～6〕。研究显示，CRNDE在脂多糖诱导的肺成纤维Wl-38细胞中表达上调，过表达CRNDE可明显促进细胞凋亡及炎症因子表达〔7〕。目前，CRNDE对血管内皮细胞的影响还未知。生物信息学软件显示，CRNDE可能靶向结合miR-29a-3p。miR-29a-3p在脑卒中患者血清中表达下降，其表达降低可能减弱了对Kruppel样因子(KLF)4表达的抑制作用，从而促进肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素(IL)-10等炎症介质的产生，加速AS进程〔8〕。本研究以建立氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管内皮细胞EVC-304损伤模型，探讨了CRNDE对ox-LDL诱导的EVC-304细胞氧化应激及凋亡的影响及其是否通过调控miR-29a-3p发挥作用，以期为AS的治疗提供分子靶点。

1 材料与方法

1.1细胞和实验试剂 EVC-304细胞系，中国科学院上海细胞所；胎牛血清，杭州四季青公司；DMEM培养基、双荧光素酶报告基因检测试剂盒、二喹啉甲酸(BCA)蛋白测定试剂盒，北京索莱宝；逆转录试剂盒和PCR试剂盒，大连宝生物；丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)，南京建成；……