权兴苗 宋春侠 范丽洁 徐立伟 刘玉兰 王月

(1承德医学院附属医院中医科，河北 承德 067000；2河北中医学院)

围绝经期综合征(PMS)主要发生于绝经期女性患者，就诊主诉多为五心烦热，心悸失眠，烦躁易怒和心绪不宁，病情严重者可影响正常的生活和工作〔1,2〕。既往研究表明，祖国医学对于PMS有一定的疗效，二仙汤〔3〕和六味地黄丸〔4〕均可在一定程度上缓解PMS的临床症状，但效果有限。平肝补肾方是最新兴起的一种中医药治疗方案。主要针对肾虚的主要症状，其以温肾阳，滋肾阴，泻肾火为主，以适应阴阳俱虚于下的症状〔5,6〕。本研究以平肝补肾方为治疗方案，构建PMS细胞模型，观察其对PMS治疗效果。

1 材料与方法

1.1实验动物与材料 胎牛血清(FBS，BI公司，以色列)；DMEM培养液、AV-PI凋亡试剂盒及2.5 g/L胰酶Trypsin(Invitrogen公司，美国)；Trizol及逆转录试剂盒(Takara公司,日本)；实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)仪(Bio-Rad公司，美国)；Transwell试剂盒及CCK-8试剂盒(北京碧云天公司，中国)，以SPF级雌性离乳大小鼠30只为研究对象，体重(91.3±3.6)g，购自山东省济南市实验动物中心许可证书编号：〔SCXK(鲁)2016-0893〕。

1.2方法

1.2.1PMS细胞模型的构建〔7〕待雌性SD大鼠性成熟后，脱颈椎处死，放入盛有75%酒精的玻璃缸内，浸泡2 min以消毒。取至无菌洁净台，解剖刀处理SD大鼠，在无菌的条件下，把卵巢及周围附着的脂肪组织一并取出，迅速放入灭菌的25 cm2培养皿内，然后在超净台内用磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗卵巢3次。解剖刀去除多余的脂肪、结缔组织和输卵管等附件，再次用含5%FBS的培养基冲洗1次，放入盛有培养基的培养皿中，在体视显微镜下用注射针头刺破卵泡，轻轻挤压，钢筛过滤，1 500 r/min离心，细胞计数仪计数；……