李荣，江佳佳,2，钱晖，许文荣,2

(1.江苏大学医学院，江苏省检验医学重点实验室，江苏镇江 212000；2.江苏大学澳洋肿瘤研究院，江苏张家港 215600)

胃癌是我国最常见恶性肿瘤之一，现阶段急需发掘新的生物学标志物并建立方便、微创、灵敏和特异的诊断方法[1]。近年来研究发现，环状RNA(circular RNAs，circRNAs)广泛存在于人体各组织和体液(包括外泌体)中，种类与数量丰富，具有稳定性、物种保守性和组织、时序、疾病特异性，目前已成为最具前景的分子标志物[2]。此外，环状RNA在多种疾病尤其是肿瘤中具有重要的调控作用，可作为miRNA分子海绵，通过碱基配对吸附miRNA，解除其对下游靶基因的抑制效应，具有作为新型治疗靶点的潜在价值[3]。另有研究表明，环状RNA与胃癌进展密切相关，可作为胃癌诊疗的新分子标志物[4]。因此，本研究建立检测环状RNA hsa_circ_002059表达的实时荧光定量RT-PCR法，并探讨其在胃癌组织与外周循环血液中表达的临床意义。

1 材料和方法

1.1主要试剂及仪器 miRNeasy 组织细胞RNA提取试剂盒、miRNeasy血浆RNA提取试剂盒(德国Qiagen公司)，HiScript逆转录试剂盒、AceQ定量PCR试剂盒、10×DNA上样缓冲液、100 bp DNA Marker(南京诺唯赞公司)，ExoQuick血浆外泌体提取试剂(美国SBI公司)。NanoDrop ND-2000微量分光光度计(美国Thermo公司)，CFX96实时荧光定量PCR仪(美国Bio-Rad公司)，GenoSens凝胶成像分析仪(上海勤翔仪器公司)。

1.2标本来源 收集于2015年4月至2016年11月在镇江市第一人民医院普外科初次确诊为原发性胃癌患者的组织标本87例，其中男性63例，女性24例，年龄35～88岁，中位年龄66岁。纳入标准：(1)经临床医师确诊为原发性胃癌，组织病理切片经病理科医师复核确认；……