补阳还五汤对间歇低氧大鼠胰腺应激蛋白及超微结构的影响

2021-10-26吴润华

广西中医药大学学报 2021年3期

关键词：模型

刘丹，吴润华，魏敏，陈沁

（1.福建中医药大学中西医结合学院，福建福州 350122；2.福建中医药大学临床技能教学中心，福建福州 350122）

睡眠呼吸暂停综合征（OSAHS）是一种慢性睡眠障碍疾病，慢性间歇低氧（CIH）是其主要病理过程［1］。SENFT 等［2］研究发现，CIH 环境下细胞错误蛋白与非折叠蛋白增多，由此产生了内质网应激（ERS）反应，促进胰岛素抵抗（IR）形成。由此可见，OSAHS 和2型糖尿病在临床上相互影响，相互促进。研究表明，GRP78蛋白在ERS发生时表达上调，被认为是 ERS 的标志性因子［3］；在 ERS 诱导细胞凋亡的机制中，最常见的信号通路为CHOP 和Caspase-12，它们的升高同样提示内质网应激的发生［4］。补阳还五汤为益气活血之代表方剂［5］，在临床上对于改善OSAHS 患者症状具有良好效果，本研究通过间歇低氧处理制备CIH 动物模型，探讨补阳还五汤改善内质网应激反应的机制，为临床应用中药治疗OSAHS提供依据。

1 实验材料

1.1 动物 24 只 8 周龄 SD 雄性大鼠，SPF 级，体质量（180±20）g，购自上海SLAC实验动物有限公司，实验动物许可证号：SCXK（沪2017-0005），批号：2007000531494。

1.2 试药补阳还五汤由黄芪30 g、当归尾9 g、赤芍12 g、地龙12 g、川芎 12 g、红花 3 g、桃仁3 g 组成。将上述药物置于煎煮锅内，加入5～7 倍药材量的水浸泡1 h，沸水煮30 min，过滤，剩余药渣再加入3～5倍量的水，沸水煮20 min，过滤。合并2次滤液，水浴浓缩至浓度为0.5 g/ml的药液，冷却后装进灭菌药瓶内，置于4 ℃保存。

1.3 试剂胰岛素放射免疫法测定试剂盒（北京北方生物技术研究所）；Rabbit anti-rat Caspase-12 抗体（SANTA CRUZ 公司）；CHOP 抗体（SANTA CRUZ公司）；二抗（Zymed 公司）；GRP78试剂盒及二抗（赛默飞世尔科技有限公司）。