病理组织芽生菌感染的特殊染色方法分析
2021-10-21谢文林唐翠兰连家燕
谢文林,唐翠兰,连家燕*
(1中山大学附属第七医院病理科,深圳 518107;2中山大学附属第一医院病理科,广州 510080)
着色芽生菌病(chromoblastomycosis,CBM)是由多种暗色真菌引起的皮肤和皮下组织的慢性肉芽肿性疾病[1]。CBM的确诊须借助组织病理和真菌学检查。病理组织可见厚壁棕黄色孢子,同时伴有表皮假上皮瘤样增生、化脓性肉芽肿性炎、纤维增生机化等病理改变,具有诊断意义。真菌学检查主要包括脓液或皮损组织直接镜检,可见棕色圆形厚壁分隔的孢子(硬壳小体)[2]。本研究对15例已明确诊断为芽生菌感染的石蜡包埋组织同时进行PAS染色、六胺银染色、抗酸染色和爱尔新蓝染色(pH2.5),比较这4种染色方法检测显示病变组织中芽生菌的优缺点,探讨哪一种特殊染色方法更适合于临床病理诊断。
材料与方法
1 材料
选取中山大学附属第一医院2008~2021年及中山大学附属第七医院2018~2021年病理送检组织中诊断为芽生菌感染病例共15例,所选标本均经4%中性缓冲甲醛溶液固定,常规脱水、透明、浸蜡和石蜡包埋,连续切片5张,切片厚度4~5μm。
2 染色方法
2.1 爱尔新蓝染色(pH2.5)
常规切片,脱蜡至水后,爱先蓝液(pH2.5)染15~20min,蒸馏水稍水洗,核固红染3~5min,蒸馏水稍洗,常规脱水、透明、中性树胶封片。
2.2 抗酸染色
常规切片, 汽油松节油混合液脱蜡至水后,滴入苯酚碱性品红液于室温染色30~40min,流水冲洗3~5min,20%硫酸分化1~2 min,流水冲洗3min,Mayer苏木素复染1min,流水冲洗5min, 于56~60℃烤箱烘干,二甲苯透明、中性树胶封片。
2.3 PAS染色
常规切片,脱蜡至水后,0.5%高碘酸氧化15min,蒸馏水冲洗1min,8%铬酸氧化15min,蒸馏水洗1min,无色品红液加盖避光于42℃水浴箱中染5min,流水冲洗3min,Mayer苏木素复染30s,返蓝液返蓝20s,流水冲洗1min,常规脱水、透明、中性树胶封片。……
