王红娟，胡雯，雷子贤，康晓静

（新疆维吾尔自治区人民医院皮肤性病科，新疆皮肤病研究重点实验室，乌鲁木齐 830001）

白癜风是一种慢性炎症性疾病，其特征是表皮黑色素细胞丢失引起的皮肤脱色。白癜风中黑色素细胞的破坏已被归因于多种病因学理论，氧化应激的发生和CD8+T细胞毒性的产生可直接导致细胞凋亡和分化[1,2]。白癜风的病因和发病机制尚不明确，较多学者支持氧化应激理论，氧化应激在白癜风的发生以及发展中起着重要的作用，可能破坏黑素细胞[3,4]，黑素细胞释放的HMGB1有助于形成氧化应激引起的白癜风自身免疫[5]。最近研究证明氧化应激有助于暴露源自黑素细胞的自身抗原，此外，氧化应激会促进角质形成细胞分泌促动素，从而介导皮肤白细胞病变中T细胞的浸润[6]。异鼠李素（isorhamnetin, ISO）属于黄酮类化合物，可抑制乙酰胆碱酯酶活性、氧化应激、细胞凋亡和炎症[7]。ISO可通过激活Nrf2并促使其下游靶基因（ERK1/2, PKCδ和 AMPK）的表达来发挥抗氧化应激作用[8]。目前关于ISO对人表皮黑素细胞抗氧化作用的研究未见报道，本实验初步研究在体外人表皮黑素细胞培养条件下，用ISO预处理黑素细胞，H2O2诱导人表皮黑素细胞氧化应激模型，通过对黑素细胞增殖、黑素合成的检测，研究ISO对黑素细胞氧化损伤的保护作用及对黑素合成的影响。

材料与方法

1 材料

M2黑素细胞生长培养基DEMEM/F12，含5ng/mL碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）（Promocell公司），0.25%胰酶（含0.02%EDTA）。异鼠李素（中国食品药品检定研究院），30% H2O2原液（美国sigma公司），二甲基亚砜（DMSO）（美国sigma公司），CCK-8试剂（日本Dojindo公司），左旋多巴（美国Sigma公司），活性氧检测试剂盒（南京建成生物工程研究所）。……