庄博，张健，孙铁权，李佳鑫，乔建伟，韩禹华，李佳鑫

（1辽宁省葫芦岛市中心医院眼科，葫芦岛 125000；2辽宁省葫芦岛市中心医院龙湾院区眼科，葫芦岛 125000；3葫芦岛市南票矿务局总医院五官科，葫芦岛 125027；4葫芦岛市连山区医院眼科，葫芦岛 125027；5石家庄市第一医院眼科，石家庄 050000）

糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy, DR）是一种常见的I型和II型糖尿病的微血管并发症，在我国糖尿病患者人群中的发病率为23.0%[1]。视网膜色素上皮（retinal pigment epithelium, RPE）细胞是DR体外研究的常用眼内细胞之一，具有合成黑色素及生成过氧化脂质等多种生理功能[2,3]。既往研究表明，RPE细胞长期处于高糖环境下可产生活性氧，诱发氧化应激以及炎症反应，从而导致RPE细胞损伤发生DR[4]。目前对于RPE细胞损伤常采用抗氧化类以及抗血管生成类药物治疗[5]。阿柏西普（aflibercept，ABC）是一种抗血管生成的融合蛋白，有研究发现其可抑制体外培养的高糖环境下人视网膜Müller细胞K+通道，抑制高糖诱导的Müller细胞凋亡，促进细胞增殖[6]。然而ABC在DR中的作用机制尚不清楚。另外，已有研究证实PI3K/AKT信号通路的激活与视网膜色素上皮细胞损伤有关[7]，PI3K/AKT信号通路的激活可促进视网膜新生血管的形成[8]。本研究使用高糖刺激RPE细胞模拟DR模型，旨在探讨ABC通过PI3K/AKT信号通路对高糖诱导的RPE细胞损伤的影响。

材料与方法

1 材料与仪器

人视网膜色素上皮细胞APRE-19购自美国ATCC公司；阿柏西普（规格：0.1ml/4mg，批号：191211，批准文号：注册证号S20180001）购自德国Vetter Pharma-Fertigung GmbH&Co.KG公 司；一抗PI3K磷酸化蛋白（p-PI3K）抗体（1:1000，ab195854）、一抗AKT磷酸化蛋白（p-AKT）抗体（1:1000，ab8933）、GAPDH（1:2000，ab8245）和HRP偶联的山羊抗兔IgG（1:2000，ab6721）均购自上海Abcam公司；……