姚彦红吴晓卫张伟

(1.甘肃医学院病原生物学教研室，甘肃 平凉 744000；2.深圳市尚维高科有限公司分子生物学研究室，广东 深圳 518000)

前言

圣路易斯脑炎病毒(St.Louis encephalitis virus，SLEV)隶属于黄病毒科(family Flaviviridae)黄病毒属(Flavivirus)，病毒直径大小为40～50nm，有表面突起的囊膜和浓集的核心，其基因组为单股正链RNA[1]。血清学分类与日本脑炎病毒、西尼罗热病毒、墨累谷脑炎病毒等同属乙型脑炎病毒群[2]。SLEV病毒于1933年首次发现于美国，主要流行于北美洲的密西西比河和俄亥俄河流域等区域，虫媒是这种病毒的关键传播载体，容易导致感染者患上颇为严重的中枢神经系统疾病，目前并无专门的疫苗与特效药[3,4]。

圣路易斯脑炎病尚未在我国暴发流行，故国内对此病原检测技术的研究目前很少，2017年张娜娜等[5]报道了一种基于制备含SLEV基因的假病毒颗粒的荧光定量PCR检测方法用于检测圣路易斯脑炎病毒，该方法的最低检测限为1.8×103copies·mL-1。但是近些年，国际交流频繁度不断攀升，这意味着这种病毒有较大几率传入我国。为此，开发一种安全有效、简便快捷的检测方法对于该病毒的及时诊断和防控具有重要意义。

本文主要研究重组质粒技术结合荧光定量实时PCR检测方法，这种方法凭借其灵敏度高、检测快速、特异性高等优势，在病原的基因表达水平分析、定量定性检测等领域运用颇广[6]。通过合成含有圣路易斯脑炎病毒的保守靶标基因和设计特异性引物和TaqMan探针，建立一种圣路易斯脑炎病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法，并对该方法进行验证测试，探究其对于圣路易斯脑炎病毒的检测效果，为相关部门或医疗机构对圣路易斯脑炎病毒的流行病学调查和传染病监测提供一种技术基础。……