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应用脑脊液分离病原菌短期培养物构建快速检测流程的研究

2021-10-18李方强郑光辉张艳张国军

中国医药生物技术 2021年5期
关键词:差异

李方强,郑光辉,张艳,张国军

作者单位:100070 北京,首都医科大学附属北京天坛医院实验诊断中心/国家药监局体外诊断试剂质量控制重点实验室/北京市免疫试剂临床工程技术研究中心

中枢神经系统感染是一类由于病原微生物侵犯中枢神经系统的实质、被膜以及血管而引起的急慢性炎症,是院内常见、严重的并发症之一,可导致严重的后遗症,甚至危及患者的生命[1-2]。传统病原学诊断方法需要将阳性脑脊液培养液转种到固体培养基上,过夜孵育以得到足够的单个菌落来进行细菌鉴定和药敏试验,但整个过程耗时漫长。基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time of flight-mass spectrometer,MALDI-TOF MS)是近些年发展起来的一种细菌鉴定技术,可快速完成细菌鉴定[3]。在此基础上,研究者们还尝试了很多将鉴定过程进一步提速的方案,如直接对阳性培养物进行洗涤离心、过滤等,富集蛋白以直接质谱鉴定[4]。但这些方案往往过程较为复杂,或容易产生额外成本。本研究探讨了利用脑脊液阳性培养液转种后的短期培养物,直接质谱鉴定,并开展快速药敏试验的方案,与常规质谱鉴定加常规药敏试验的结果比较,验证该方案的可行性,以构建新的检测流程。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 标本来源 收集 2018年11月–2019年10月北京天坛医院脑脊液培养阳性样本 216 例,培养液经革兰染色后证实为单一细菌感染,仅保留患者第一次脑脊液培养阳性样本。质控菌株为大肠埃希菌 ATCC 8739、金黄色葡萄球菌 ATCC 29213、大肠埃希菌 ATCC 25922。……

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