非洲猪瘟病毒CD2v抗体间接ELISA方法的建立及其初步应用
2021-10-17凌占业杨洪雨
凌占业,徐 倩,杨洪雨
(河南省黄泛区鑫欣牧业股份有限公司,河南 周口 466632)
非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)引起的一种急性、烈性、高度接触性传染病,属于非洲猪瘟病毒科、非洲猪瘟病毒属的唯一成员,发病患畜多表现为高热、皮肤发绀、内脏器官明显出血、呼吸障碍及神经症状等,强毒株感染后发病率和死亡率最高可达100%,对养猪业造成重大的经济损失。1921年,英国兽医学家Montgomery等首次报道肯尼亚的ASF疫情[1-2];2007年,ASF疫情在高加索地区的格鲁吉亚出现,随后迅速蔓延至俄罗斯联邦以及东欧等周边国家[3-4];2018年8月1日我国辽宁省沈阳市沈北地区发现了ASF疫情,经B646L/p72基因进化树分析发现该病毒属于基因Ⅱ型,与俄罗斯和东欧流行的Georgia 2007/1毒株属于一个进化分支[5],目前我国多处如江苏、安徽、河南及内蒙古等已发现ASF疫情。世界动物卫生组织(OIE)将其列为法定报告动物疫病,我国将其列为一类动物疫病。
ASFV是一种有囊膜的单分子双链DNA病毒,大小约为170~190 kb,在其基因组结构中,中间125 kb为保守序列,两端为可变区,基因组含有151~167个开放阅读框(ORFs),编码150~200种蛋白质[6-10],其中存在许多与病毒复制、免疫逃逸、病毒传播等相关的蛋白。ASFV EP402R基因全长为1 083 bp,编码的蛋白大小为41 ku,是嵌入病毒囊膜外表面的膜蛋白,类似于T淋巴细胞表面的黏附受体CD2,所以命名为CD2v[11]。它由信号肽、跨膜域及147个氨基酸的胞质尾组成,是ASFV晚期表达蛋白,可以导致红细胞吸附于病毒感染细胞表面,有助于其在宿主体内扩散[12];该蛋白具有抑制有丝分裂原刺激淋巴细胞增殖的作用,具体机制可能是通过CD2v细胞外结构域与淋巴细胞表面配体的直接相互作用,或通过CD2v细胞质中结构域与胞质蛋白相互作用而介导[13]。……
