王 星，柴文栋，杨 俊，张小芳,姬广海

(1.河南省舞钢市质量技术检验测试中心，河南 舞钢 462500；2.河南省舞钢市枣林镇中心小学,河南 舞钢 462500;3.云南农业大学 植物保护学院，云南 昆明 650000)

1 引言

水稻是我国重要的粮食作物，我国水稻栽培面积占世界水稻栽培总面积的20%。造成水稻大量减产的细菌性第一病害水稻白叶枯病是由Xanthomonasoryzaepv.oryzae(Xoo)引起的。带菌种子传播是该病害传播的主要途径之一，在种子市场监管中由于缺乏高效的检测方法，往往造成带菌种子在市场中流通，给市场监管工作带来不必要的麻烦，目前常用的水稻白叶枯病菌检测方法主要根据病害特征识别和实时荧光PCR方法，但是这些方法效率低且成本贵的不足之处，因此，建立一个高效、准确的带菌种子的检测方法十分必要。

LAMP(Loop-mediated isothermal amplification)又被称为“环介导等温扩增反应”，国外相关学者发明的一种新型、快速、简便的核酸扩增方法[1]。LAMP具有操作简便，成本低、易识别、灵敏度高等优点，此外该技术还可用于体外难培养甚至无法培养的病原菌的检测，例如病毒的检测。目前，LAMP检测技术已被国内外众多学者成功用于各类病原菌的检测[2～4]。该方法具有简单、快速和灵敏的特点。因此，相对落后的普通PCR技术有望被LAMP技术在菌物检测中替代。

本研究建立了一种利用可视化环介导等温核酸扩增技术(LAMP)检测水稻白叶枯病原菌Xoo的方法。采用SYBR Green l染料法对扩增产物闭管检测，可视化快速得到结果，通过该研究以期基层市场监管中监测水稻白叶枯病菌提供新的技术手段。……