陈秋迎 陈迅

(泉州市第一医院口腔科，福建 泉州 362000)

牙髓炎是指由细菌及其产物等引发的牙髓组织炎症反应，研究表明牙龈卟啉单胞菌作为革兰阴性厌氧杆菌可促进牙髓及根尖周感染从而诱发牙髓炎〔1,2〕。脂多糖(LPS)可促进牙髓感染根管内炎性因子表达从而参与牙髓炎发生过程〔3,4〕。

目前关于牙髓炎发生机制尚未完全阐明，因而深入探究牙髓炎发生发展机制有助于降低发病率及提高治疗效果。微小RNA(miR)-27a-3p在LPS诱导人牙髓细胞中呈高表达并可能促进炎症反应的发生〔5〕。miR-27a可抑制牙髓干细胞增殖、迁移及分化〔6〕。TargetScan预测显示驱动蛋白2家族蛋白(KIF)3A可能是miR-27a的靶基因，研究表明KIF3A表达量与牙间充质干细胞/前体细胞成骨分化有关〔7〕。本研究通过LPS诱导人牙髓细胞(hDPC)，探讨miR-27a对hDPC增殖、凋亡及其分泌炎症细胞因子的影响，分析其与KIF3A的靶向作用关系。

1 材料与方法

1.1材料与试剂 LPS购自欣博生物科技有限公司；Ⅰ型胶原酶、青-链霉素双抗均购自美国Gibco公司；Trizol试剂与Lipofectamine2000购自美国Invitrogen公司；反转录试剂盒与SYBR Green荧光染料均购自瑞士Roche公司；人白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-8酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒购自美国Raybiotech公司；兔抗人Toll样受体(TLR)4多克隆抗体、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、酶切含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3抗体均购自美国Sigma公司；anti-miR-27a、anti-miR-con、miR-27a mimics、miR-con、si-KIF3A、si-con均购自上海吉玛制药技术有限公司；四甲基偶氮唑蓝(MTT)与细胞凋亡试剂盒均购自中国碧云天生物技术研究所。

1.2方法

1.2.1hDPC分离 收集泉州市第一医院口腔科门诊因正畸或阻生拔除的健康完整前磨牙与第三恒磨牙，患者20例，其中男11例，女9例，所有患者及家属知情且签署同意书。……