黄芪通过上调缺氧诱导因子-1α表达对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用
2021-10-14刘明明殷涛
刘明明 殷涛
(赤峰学院附属医院普外二科,内蒙古 赤峰 024000)
肝缺血再灌注损伤(HIRI)常并发于肝部分切除术、肝移植等很多的肝外科手术中,它是各种机制相互作用对肝细胞造成损害,进而导致肝功能受损,最终造成肝衰竭,严重影响患者预后〔1~3〕。缺氧诱导因子(HIF)-1α是一种在低氧条件下发挥作用的重要转录调节因子,在常氧条件下HIF-1α被降解而表达很少,在低氧条件下HIF-1α被激活而大量表达,研究证实,HIF-1α在调整细胞凋亡中起重要作用〔4~6〕。二甲基乙二酰甘氨酸(DMOG)是脯氨酸羟化酶的抑制剂,通常采用此方法来稳定HIF-1α的表达。本研究利用大鼠肝缺血再灌注(HIR)模型,向大鼠体内注入黄芪注射液及DMOG进行预处理,观察大鼠HIRI后生化指标、免疫组化表达、凋亡情况及肝细胞形态变化,进而探讨黄芪对大鼠HIRI的保护作用机制。
1 材料与方法
1.1动物与分组 雄性SD大鼠96只购于赤峰学院实验动物中心,体重(220±20)g,随机分为4组:假手术(Sham)组、缺血再灌注(IR)组、黄芪(AG)组和AG+DMOG组,各组按再灌注1、6、12、24 h分为不同的时间点。
1.2主要试剂 AG注射液生产于成都地奥九泓药业有限公司(批号:Z51021775)。HIF-1α免疫组化试剂盒是由上海市雅吉生物科技提供。HIF-1α引物是由上海生物工程技术服务有限公司提供;逆转录试剂盒购自日本TOYOBO公司。B细胞淋巴瘤(Bcl)-2和Bcl-2相关X蛋白(Bax)酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒购自南京森贝伽生物科技有限公司。TUNEL细胞凋亡检测试剂盒购自上海前尘生物科技有限公司。
1.3方法
1.3.1建立动物模型 建立大鼠HIRI模型采用Pingle法。实验大鼠术前12 h禁食,不限饮水,称体重。……
