张宇洁，杜 研，张欣蕾

（西安医学院 药学院，陕西 西安 710021）

蛴螬，是金龟子的幼虫，具有破血、行瘀、通乳等多种药理作用, 主治淤痛、痛风、破伤风和喉痹等。蛴螬多糖是其主要活性成分，与植物多糖相比，动物多糖的活性更加突出。现有研究表明, 蛴螬多糖对抑制肿瘤生长有重要的作用[1]。目前，国内对于蛴螬多糖的研究主要在于提纯分离和其抗肿瘤的生物学活性方面[2]。多糖类由于其分子量较大，结构复杂，缺乏发色基团和荧光基团，使其难以检测，给其生物机制及药代动力学的相关研究带来极大困难，无法确切知道其是如何发挥作用的。

本文利用多糖的还原末端与荧光物质8-氨基-1,3,6 奈三磺酸二钠盐（ANTS）进行反应，对蛴螬多糖进行荧光标记，对标记结果进行验证，然后通过单因素实验考察合成过程中的某些参数是否对其有影响，并测定了荧光取代度，实现了荧光检测器检测或追踪多糖，为多糖的生物机制研究及药代动力学的研究提供一定思路。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

BS-100A 自动部分收集器、HL-1B 数显恒流泵（上海沪西分析仪器厂）；荧光分光光度F-4600（株式会社日立制作所）；Multiskan GO 酶标仪1510（Thermo Fisher Scientific）；Agilent cary100 型双波长紫外可见分光光度计、HPLC Agilent 1260InfinityⅡ型、荧光检测器G7121A（Agilent 公司）。

8-氨基-1,3,6 奈三磺酸二钠盐（98%）、氰基硼氢化钠（95%）（Aladdin）；Sephadex G-25（生物技术级）（GE healthcare）；蛴螬均一多糖（实验室自制）。

1.2 实验方法

1.2.1 ANTS 标记蛴螬多糖的方法 精密称定蛴螬多糖约10mg，溶于1mL 新鲜配制的0.2mol·L-18-氨基-1，3，6 奈三磺酸二钠盐（ANTS）的醋酸水溶液中（pH 值为5.5）。再向体系中加入1mL 新鲜配制的1.0mol·L-1NaBH3CN 的二甲基亚砜（DMSO）溶液，于40℃恒温水浴下密闭，避光反应20h。……