杨 彬， 刘 川， 张 大 伟， 张 春 枝

( 1.大连工业大学 生物工程学院， 辽宁 大连 116034；2.中国科学院 天津工业生物技术研究所， 天津 300308 )

0 引 言

核黄素，又名维生素B2，是一种人体必需的维生素[1]。核黄素应用广泛，可以用作食品添加剂，饲料添加剂以及制作药品，具有广泛的应用前景[2]。核黄素的生产方法有3种，分别为化学合成法、半化学合成法和生物发酵法[3]。由于生物发酵法生产核黄素产量高且成本低，目前已成为核黄素大规模生产的方法[4]。用于核黄素生产的菌株有枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、阿舒假囊酵母(Eremotheciumashbyii)以及曾经用于生产的酵母念珠菌(C.famata)[5-7]。枯草芽孢杆菌作为一种安全高效的模式菌株是核黄素生产的主流菌株。

核黄素的代谢通路可以分为3个部分[8]：磷酸戊糖途径合成核黄素前体物质核酮糖-5-磷酸(Ru5P)，嘌呤代谢途径合成黄素的另一前体物质鸟苷三磷酸(GTP)，核黄素合成途径利用Ru5P与GTP合成核黄素[9]。核黄素的代谢通路已经研究清楚，通过分析高产菌株的核黄素代谢通路变化，可以为从头构建一株高产核黄素菌株提供思路。

本研究通过发酵测定一株高产核黄素的枯草芽孢杆菌SYL-1高产菌株的核黄素产量，使用实时荧光定量PCR系统分析其核黄素代谢通路基因表达量变化，探明这一高产核黄素菌株的核黄素代谢通路的变化，以期为枯草芽孢杆菌高产核黄素提供数据基础和改造思路。

1 材料与方法

1.1 材 料

菌种：高产核黄素菌株SYL-1，具有红霉素抗性基因，实验室保藏；低产核黄素菌株LY-05，实验室构建。……