非洲猪瘟病毒p11.5蛋白的表达及其单克隆抗体的制备
2021-10-09赵少若梁严予郑丁丁王彦伟郝丽影逄文强邓均华田克恭
赵少若,梁严予,郑丁丁,王彦伟,郝丽影, 逄文强, 邓均华*, 田克恭,*
(1. 洛阳普泰生物技术有限公司,河南 洛阳 471000;2. 国家兽用药品工程技术研究中心,河南 洛阳 471000)
非洲猪瘟(African swine fever)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV) 引起的一种烈性、传染性强的动物疫病,可感染所有品种和年龄的家猪、野猪,发病率和死亡率最高可达100%,症状与传统猪瘟相似,以全身出血、呼吸障碍和神经症状为主要特征[1-3]。非洲猪瘟于1921年在非洲肯尼亚首次被发现,此后传入欧洲和美洲多个国家,2000年后在临近中国的俄罗斯、乌克兰陆续暴发。2018年我国沈阳市首次报道非洲猪瘟疫情,随后全国各地陆续发生,对我国养猪业和国民经济造成巨大损失[4-5]。
ASFV为非洲猪瘟科、非洲猪瘟病毒属的唯一成员,是一种独特又复杂的病毒,可感染软蜱,同时在脊椎动物和无脊椎动物中复制[6-8]。ASFV为有囊膜的二十面体对称的双股DNA病毒,外形为正六边形,直径175~215 nm,基因大小介于170~190 kb之间,包含151个开放阅读框,基因组编码150~200个蛋白[9-11]。目前对ASFV病原特性和致病机制的认识并不充分,仍无有效的治疗或预防措施,为了更深入地研究该病毒,研究者们已经确认了多个ASFV结构蛋白,p11.5是结构蛋白中的一种,产生于病毒感染的晚期,分子量为12~13 kDa,是病毒的结构组成部分之一[12],但是目前针对该蛋白的报道较少。本研究通过构建重组原核质粒pET28a-SUMO-p11.5进行原核表达,对重组蛋白SUMO-p11.5进行纯化,制备了针对p11.5蛋白的单克隆抗体,为p11.5蛋白生物学功能的研究、ASFV致病机制及诊断试剂产品的研发提供了重要的生物材料。……
