沙拉沙星、二氟沙星直接竞争化学发光酶联免疫检测方法的建立
2021-10-09李思蒋蔚卢春慧程婷婷孙卫东王权
李思,蒋蔚,卢春慧,程婷婷,,孙卫东,王权*
(1. 中国农业科学院上海兽医研究所,上海 200241; 2. 南京农业大学动物医学院,江苏 南京 210095)
氟喹诺酮类药物已广泛运用于人[1-2]与动物[3-4]疾病的治疗当中,其中盐酸二氟沙星、盐酸沙拉沙星为兽类专用药[5]。二氟沙星可通过脱甲基作用生成其活性代谢产物沙拉沙星,从而起到抗菌效果[6]。沙拉沙星是由美国雅培公司在1995年上市,并获得FDA批准的第一个可用于食用动物的氟喹诺酮类药物[7]。临床上以盐酸沙拉沙星的形式用药,因其抗菌谱广、药效良好,所以被广泛用于畜禽及水产类的细菌感染防治[8-9]。此外,盐酸沙拉沙星价格低廉,是畜禽养殖户的用药首选,又由于不规范用药或滥用的现象时有发生,易导致畜禽体内细菌耐药性增强[10],通过食物链对消费者的神经系统、葡萄糖代谢、皮肤等造成潜在的危害[11]。我国农业部已明文规定了二氟沙星、沙拉沙星在鸡肉当中的最大残留量分别为300 μg/kg、10 μg/kg[12],美国已经全面禁止了氟喹诺酮类药物在养殖领域的使用[13]。国内外用于沙拉沙星残留检测的方法主要包括:免疫分析方法[14]、高效液相色谱法(HPCL)[15]、液相色谱-质谱联用法(LC/MS)[16-17]、超高效液相色谱法(UPCL)[18]等,其中后3种方法需要复杂且耗时长的样品前处理,而且检测仪器昂贵,不适用于市场上大量样品的快速检测。免疫分析方法当中主要包括酶联免疫分析方法(ELSIA)[19]、胶体金免疫层析法(GICA)[20]、荧光免疫分析法(IFA)[21]、化学发光酶联免疫法(chemiluminescence enzyme-linked immunoassay,CLEIA)[22],具有快速、高特异性、高灵敏度等特点,可满足市场上大批量快速检测的需求。……
