王稳利，曾倩倩，刘 岩，邱宗波

（河南师范大学生命科学学院/河南省农业微生物生态与技术国际联合实验室，河南 新乡 453007）

MicroRNA（miRNA）是一类由21～24个核苷酸组成的内源性单链非编码小分子RNA，主要是在转录和转录后水平指导靶miRNA的剪切或抑制翻译来调控基因的表达［1］，作为近年来一直研究的热点调控分子，miRNAs在调控高山松（Pinusdensata）的生长发育［2］、落叶松的体胚发育［3］以及生物和非生物胁迫应答过程中起着重要的作用［4］。

miR482作为植物体内一类重要的miRNA，近年来一直受到研究者们的广泛关注。利用生物信息学技术，张玉娟等［5］从棉花中鉴定出miR395a、miR396a、miR397a、miR399a、miR414a、miR482b、miR7485等64个与棉花黄萎病抗性相关的miRNA，并对获得的miRNA进行靶基因预测和功能分析。过表达马铃薯miR482e能够增强植物对黄萎病菌的敏感性［6］。Zuo等［7］研究发现miR482在番茄果实成熟软化过程中显示出不同的表达模式。利用高通量测序技术，Li等［8］从豌豆中鉴定出miR482，并发现miR482能够明显增加豌豆结荚数目。尽管miR482在多个植物中已有较为深入的研究，但目前在裸子植物高山松中，miR482的鉴定及其在高山松生长发育过程中的功能尚不清楚。

高山松是一种具有重要生态意义的针叶树裸子植物［9］。本研究从课题组前期高山松小RNA高通量测序结果中获得miR482a，并利用PCR技术进行miR482a前体序列的克隆与分析。通过在线预测网站获得miR482a的靶基因，并利用RLM-5′RACE进行验证。同时还对miR482a及其靶基因在高山松根、茎和针叶中的表达模式进行了分析，为进一步揭示miR482a在高山松生长发育中的作用提供一定的理论依据。……