王志瑛，向 韡，李卫滨,3△

1.联勤保障部队第九〇〇医院检验科，福建福州 350025；2.厦门大学公共卫生学院，福建厦门 361100; 3.福建医科大学医学技术与工程学院，福建福州 350025

败血症是由于各种细菌感染引起的全身炎症反应综合征，是临床上常见的重症感染，也是全球性的公共卫生问题。在世界范围内，每年有超过1 800万人感染败血症，其病死率高达40%[1]。败血症病原体的快速检测，对提高患者的生存率至关重要。目前，败血症实验诊断的方法主要是检测C-反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、血细菌培养，存在特异度不理想和检测时间长等局限性。相比之下，近来出现的基于聚合酶链反应(PCR)能够将诊断时间缩短至数小时，但是难以在基层医院开展。核酸适配体是通过指数富集的配基系统进化(SELEX) 技术产生的核酸分子探针，相比于传统的检测抗体，适配体的生产成本低，化学性质稳定，不存在批间差。检测靶标涵盖小的有机分子到复杂的蛋白质或全细胞，几乎能与自然界中所有的分子相互作用[2]。肽聚糖为革兰阳性和革兰阴性细菌共有的细胞壁聚合物[3]，占革兰阳性菌细胞壁干重的50%～80%，革兰阴性菌的细胞壁干重的5%～20%，Antibac1 和Antibac2 为肽聚糖核酸适配体序列[4-5]，本研究旨在以Antibac1 和Antibac2为分子探针初步建立基于适配体的qPCR新方法用于细菌检测。

1 材料与方法

1.1材料 细菌菌株：大肠埃希菌ATCC 25922，金黄色葡萄球菌ATCC 29213，铜绿假单胞菌ATCC 27853，白色念珠菌，以上均为联勤保障部队第九〇〇医院检验科微生物室保存菌株。

1.2仪器与试剂 磷酸盐缓冲液(PBS)由本实验室配制(137 mmol/L NaCl2,2.7 mmol/L KCl,4.3 mmol/L Na2HPO4·7H2O,1.5 mmol/L KH2PO4)；……