赵 洋，李俊杰，苏喆莹，李子羊，全雪丽，吴松权*

(1.延边大学农学院，吉林 延吉133002；2.百泰生物药业有限公司，北京100176)

膜荚黄芪(Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.)的干燥根是常用中药黄芪的来源之一，一直被用作中药的止汗剂、利尿剂或补品。有关药理学和临床实践的研究证实了其具有免疫刺激、强心和抗衰老的活性[1-3]。异黄酮和三萜皂苷被认为是在膜荚黄芪中发现的2种主要生物活性代谢物[4-7]。《中华人民共和国药典(第一部)》规定毛蕊异黄酮葡萄糖苷是其主要活性指标成分之一[1]，具有提供能量、增强免疫系统、促进健康活动和皮肤生长等作用[8-9]。

作为补药之长的黄芪，其需求量随着人们生活水平的提高而越来越大[10]，但目前野生黄芪资源日渐减少，黄芪的活性成分含量也不稳定。因此研究毛蕊异黄酮葡萄糖苷的生物合成规律对于保证黄芪的品质显得尤为重要。在毛蕊异黄酮葡萄糖苷生物合成途径中，以苯丙氨酸解氨酶(PAL)为起始酶，经由苯丙烷代谢途径生成4-香豆酰-辅酶A(4-coumaroyl-CoA)，在通过几种酶合成芒柄花素及毛蕊异黄酮，最后在UDP-毛蕊异黄酮葡萄糖基转移酶(UCGT)的作用下合成毛蕊异黄酮葡萄糖苷[11]。但是，还未发现克隆膜荚黄芪UCGT全长基因的研究表达。该研究以膜荚黄芪为材料，克隆UCGT全长cDNA序列，分析UCGT在不同组织中的表达特性，为毛蕊异黄酮葡萄糖苷的生物合成机制和调控规律奠定理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

黄芪药材源自长白山区野生膜荚黄芪，经延边大学农学院植物学教研室石铁源教授鉴定为膜荚黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.) Bunge。……