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多重RT-PCR MassARRAY技术检测27种呼吸道病原体方法的建立和临床应用评价

2021-09-28刘宏钱宋朝晖梁巧米

检验医学 2021年9期
关键词:检测

刘宏钱, 宋朝晖, 梁巧米

(浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院,浙江 杭州 310006)

呼吸道感染是临床较为常见的感染性疾病,尤其是在婴幼儿、老年人和免疫缺陷患者中,常常导致其出现严重的临床症状,甚至死亡。根据世界卫生组织的报道,2016年全球约有300万例患者死于下呼吸道感染[1]。常见的呼吸道感染病原体包括病毒、细菌、支原体、衣原体等。病毒性病原体主要有甲型流感病毒、乙型流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、鼻病毒、偏肺病毒、腺病毒等。细菌性病原体有肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌等。大多数呼吸道感染具有相似的临床症状,导致临床医生很难通过临床症状鉴别病原体,而快速鉴定呼吸道感染的病原体对于临床精准诊断以及用药具有重要意义。过去几年,分子检测技术快速发展,在很大程度上弥补了传统培养和免疫学检测等方法对于呼吸道病原体检测的缺陷,使呼吸道病原体的检测速度更快,灵敏度和特异性也得到了很大的提高。尤其是多重聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)病原体检测方法的建立及其在临床上的应用,使同时检测多种不同的病原体成为可能。多重PCR检测具有比较高的灵敏度和特异性,但受限于每个反应中荧光类型的数量,一般1个反应孔只能检测3~4种病原体,如果需要检测更多的病原体,则需要更多的反应孔,从而使检测的便利性和检测通量大大降低。基于液相芯片技术的NxTAG Respiratory Viral Panel可以同时检测20种病原体,包括18种病毒及其亚型、肺炎支原体和肺炎衣原体,但该试剂盒成本较高,并未广泛应用于临床。……

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