王婧婧， 吴林清， 陈如寿， 王玉丰

（1.三亚中心医院检验科，海南 三亚 572000；2. 三亚中心医院骨科，海南 三亚 572000）

肠球菌（Enterococcus）是医院感染的常见条件致病菌。近年来，耐万古霉素肠球菌（vancomycin-resistant Enterococcus，VRE）感染率逐年上升，7%～10%的菌血症由肠球菌感染引起[1-2]。VRE可引起人体多部位感染，主要是广谱抗菌药物选择性的结果。VRE可通过血液感染或定植生长方式进行直接传播，也可通过食物、医疗器械、污染环境、医护人员接触等方式间接传播[2-5]。VRE包括耐万古霉素屎肠球菌和耐万古霉素粪肠球菌，有明显的耐药性，涉及VanA、VanB、VanD、VanM和VanN等表型，其中VanA、VanB表型最为常见[5]。了解VRE的耐药基因、毒力基因、转座子结构和多位点序列分型（multilocus sequence typing，MLST）等分子流行病特征，对VRE的防控和治疗有重要价值。本研究拟探讨92株VRE临床分离株的耐药基因、转座子结构和MLST型别，为有效防治VRE提供实验室依据。

1 材料和方法

1.1 菌株来源

选取2017年6月—2020年6月三亚中心医院分离自临床样本的耐万古霉素屎肠球菌80株和粪肠球菌株12株。所有菌株分离后均保存在-80 ℃冰箱。

1.2 仪器与试剂

VITEK MS微生物鉴定系统、VITEK 2 Compact自动化鉴定药敏仪（法国生物梅里埃公司），ABI 7500 PCR仪（美国ABI公司），PowerPac basic电泳仪（美国伯乐公司），chemolum 8300凝胶紫外成像分析系统（德国Biometra公司）。聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）引物合成和测序由北京擎科生物科技公司完成。微量肉汤稀释法微生物药物敏感性试验试剂（温州康泰生物公司），M-H琼脂平板、质控菌株大肠埃希菌（ATCC 8739）购自通派（上海）生物科技有限公司。

1.3 方法

1.3.1 菌种鉴定和细菌耐药性、表型鉴定 将保存在-80℃冰箱中的菌株……