抑制SLP-2对宫颈癌细胞迁移及侵袭能力的影响*
2021-09-28赵晶蕾韦广月刘艳洁
赵晶蕾 韦广月 刘艳洁
(贵州医科大学基础医学院病理与病理生理学系,贵州 贵阳 561000)
宫颈癌是临床上常见的妇科恶性肿瘤之一,我国每年新增病例高达13万,其中大约5万人死亡[1]。手术和放化疗是治疗宫颈癌的常用手段,特别是化疗,有利于清除残余微小病灶并防止癌症的转移和复发。然而化疗容易导致耐药,且毒副作用较大。随着分子生物学的发展,分子靶向治疗已成为治疗宫颈癌的热点方向[2]。stomatin样蛋白2(stomatin-like protein 2,SLP-2)是一种外周膜蛋白,属于stomatin基因超家族成员,可以调节线粒体蛋白的稳定性。本研究以人宫颈腺癌Hela细胞和鳞癌Siha细胞为研究对象,通过小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制SLP-2的表达,以观察抑制SLP-2对宫颈癌细胞侵袭及迁移的影响,为抑制SLP-2靶向治疗宫颈癌的可能性提供理论依据,现将结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 试验材料 人宫颈腺癌Hela细胞和鳞癌Siha细胞购于中国科学院细胞库,常规培养于含10%胎牛血清(上海生物工程有限公司)的DMEM-1640培养基(上海北诺生物科技有限公司)中,在37℃、5%CO2孵育箱中培养。SLP-2siRNA和siRNA阴性对照均购于北京中衫金桥生物技术有限公司。转染试剂脂质体Lipofectamine TM 2000 Reagent购于上海瓦兰生物科技有限公司。抗- SLP2、抗-actin、抗-Rac1、抗-基质金属蛋白酶(MMP)2、抗MMP-9和二抗均购于上海生物工程有限公司。BioCoatMatrigel invasion chamber试剂盒购于上海泽迈生物技术有限公司。细胞侵袭及细胞培养板购于北京明阳科华生物科技有限公司。
1.2 方法
1.2.1 细胞培养和转染 Hela细胞和Siha细胞用含10%胎牛血清的DMEM-1640培养液进行培养,条件为37℃、5%CO2。用0.25%胰蛋白酶进行传代。……
