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P2X4受体介导小胶质细胞促进肠易激综合征内脏痛脊髓中枢敏化及大建中汤干预作用

2021-09-26李尧锋王俊霞杨莎莎

中成药 2021年9期
关键词:模型

武 静, 王 慧, 杨 毅, 李尧锋, 王俊霞, 杨莎莎

(1.贵州中医药大学基础医学院,贵州 贵阳 550025;2.贵州中医药大学第一附属医院五官科,贵州 贵阳 550002)

肠易激综合征(irriTab.bowel syndrome,IBS)是以反复腹痛为主要发病特征的功能性胃肠道疾病[1]。以往学者对IBS内脏痛的研究多集中在神经元[2],而忽视了在神经系统中也发挥重要作用的小胶质细胞。课题组前期研究发现大建中汤可以降低内脏高敏感,从而减轻腹痛[3-4]。本次实验通过观察大鼠脊髓腰骶段BDNF蛋白,及ox42和P2X4受体表达情况,进而揭示大建中汤治疗IBS内脏痛的神经调剂机制,为IBS内脏痛的药物治疗提供新的作用靶点和治疗方向。

1 材料

1.1 药物 大建中汤中的蜀椒、干姜、人参由贵州中医药大学第一附属医院药剂科提供,经贵州中医药大学汪毅教授鉴定为正品。按《金匮要略》原方,蜀椒二两(6 g)、干姜四两(12 g)、人参二两(6 g),配伍后制成1.5 g/mL质量浓度的水浸液;匹维溴铵片(美国Mylan Laboratories SAS公司,批号H20160396,规格50 mg/片);佐剂液态铝(美国Pierce公司,批号QD218415A);卵清白蛋白(OVA,美国Sigma公司,批号052K1275)。

1.2 动物 SPF级SD大鼠,雌鼠12只,雄性6只,体质量150~170 g,由达硕生物科技有限公司提供,实验动物使用许可证号SYXK(川)2013-24。自由饮食1周后,为使雌鼠有效怀孕,分别将2只雌鼠和1只雄鼠放在一笼,雌鼠怀孕后再分开喂养。待乳鼠出生后,选择体质量为(6.42±0.57)g的48只雄性未断乳乳鼠作为实验对象。

1.3 试剂 注射用戊巴比妥钠(美国SCRC公司,批号WS20060401,规格0.5 g);ox42(英国Abcam公司),二步法免疫组化试剂盒(北京中杉金桥公司,PV-6001、PV-6002),DAB显色剂(北京博奥森有限公司);BCA蛋白浓度测定试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司,批号P0009);……

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