徐丹妮 张巍 牛昀

三阴性乳腺癌（triple-negative breast cancer，TNBC）是乳腺癌中一类高度恶性的分子亚型，患者术后复发、转移率高，预后较差[1-2]，迫切需要寻找有效的治疗靶点和预后标志物[3]。视黄酸受体相关孤儿受体-γ（retinoic acid receptor-related orphan receptor-γ，ROR-γ）是RORC 基因编码的一种核受体和转录因子[4]，参与了细胞分化、代谢、免疫调节等过程，并在前列腺癌、皮肤癌等恶性肿瘤中异常表达[5]。在乳腺癌，ROR-γ 的作用尚不明确，并鲜有组织水平蛋白表达的检测与报道。本研究基于对乳腺癌公共数据库和TNBC 临床样本的检测分析，旨在探讨ROR-γ 在TNBC 组织中的表达特点及预后意义。

1 材料与方法

1.1 病例资料

收集2011年1月至2014年12月收治于天津医科大学肿瘤医院的269 例乳腺癌患者的组织标本和临床病理资料。纳入标准：1）原发性乳腺癌；2）术前未行放疗、化疗等辅助治疗；3）病理诊断结果为TNBC；4）未合并其他系统的恶性肿瘤；5）病历资料完整。本研究符合本院伦理委员会的伦理标准，所有患者均已签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 数据收集 获取Oncomine 网站（https://www.oncomine.org/resource/login.html）“TCGA Breast，Invasive Ductal and Lobular Carcinomavs.Normal”和“Finak Breast”中的ROR-γ mRNA 表达数据，基因探针A_23_P372910。采用Kaplan-Meier Plotter 网站（http://kmplot.com/analysis/）分析预测ROR-γ 在乳腺癌不同分子亚型中的预后意义，基因探针206 419_at，终点事件为总生存期（overall survival，OS）、无复发生存期（recurrence-free survival，RFS）、无远处转移生存期（distant metastatic-free survival，DMFS）。设定雌激素受体（estrogen receptor，ER）、孕激素受体（progesterone receptor，PR）的免疫组织化学法（immunohistochemistry，IHC）检测状态，及人表皮生长因子受体-2（human epidermal growth factor receptor-2，HER-2）的基因表达状态以细分乳腺癌分子亚型。

1.2.2 试剂 ROR-γ 抗体（ab268112）购自美国Abcam公司；SP-9 000 通用IHC 试剂盒、DAB 显色试剂盒、EDTA 抗原修复液（pH 9.0）购自中国Zsbio 公司；苏木素染液、中性树胶购自中国Solarbio 公司。

1.2.3 IHC 检测 将组织蜡块制成4 μm 厚度的组织切片。……