李 曼，李巧琪，廖 真，林标声，鲁国东，林占熺

(1.福建农林大学生命科学学院, 福建 福州 350002; 2.国家菌草工程技术研究中心，福建 福州 350002; 3.龙岩学院生命科学学院，福建 龙岩 364012; 4.福建农林大学植物保护学院，福建 福州 350002)

【研究意义】植物内生固氮菌是指能够在玉米、水稻、牧草等许多植物体内定殖并进行联合固氮作用的一类微生物[1]，其在植物体内占据着重要生态位，通过联合固氮作用为宿主植物提供氮素或其他促生长物质[2-4]。植物内生固氮菌的种类不同，为寄主提供氮源的效率、产生植物激素类物质、促进宿主的生理变化也不同[5]。nifH基因是固氮微生物菌株最保守的功能基因[6-7]，是固氮微生物研究的理想遗传标记，nifH基因作为编码固氮酶的结构基因在生物固氮中发挥着重要作用[8]。芦竹属菌草(Arundosp.)绿洲属多年生禾本科植物，其有粗而多节的根茎，茎秆直立、根系发达，绿洲不仅可以避免大面积水土流失，而且能大量吸收保持地表水，生长快，覆盖性强，具有耐寒、耐高温、耐旱、耐盐碱及抗逆性强等优良特点。开发内生固氮菌不仅可以作为微生物制剂或菌肥应用于农业中，也可以为进一步丰富和完善禾本科植物内生固氮菌种质资源库奠定理论基础。【前人研究进展】实时荧光定量PCR(Real-time quantitative reverse transcription PCR, qRT-PCR)技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出 ,由于该技术不仅实现了 PCR 从定性到定量的飞跃 ,而且与常规 PCR技术相比，它具有特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确等优点, 目前广泛应用于研究mRNA的表达、各种基因定量分析、单核苷酸多态性分析、DNA甲基化的检测及对各种传染病进行定量定性分析等[9]。……