胡卫兵，邢军华，李伟

（仙桃市第一人民医院输血科，湖北 仙桃 433000）

近年来，由于抗生素滥用现象越来越严重，致使诸多抗生素自身敏感性及耐药性出现明显变化，进而影响临床检验工作[1]。每种细菌对非同种药物敏感性不同，尽管同一细菌的不同菌株，其形成的细菌敏感度同样存在差异，由此可知，临床治疗及诊断过程中，细菌鉴定的选择尤为重要[2]。现阶段，临床常用的细菌鉴定方法包括血清学凝集试验、镜检、直接药敏试验与常规检验等[3]。药敏试验是指利用血液样本中细菌抗药敏感度开展相应分析，以此准确鉴别细菌类型，该方法具有操作简单、方便、快捷、准确度高等特点[4]。基于此，本研究旨在分析不同细菌鉴定药敏试验在临床血液检验中的应用价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2018年4—11月本院收治的发热并存在全身感染症状患者250例，其中男160例，女90例；年龄18～65岁，平均（35.41±6.35）岁；收集所选患者血液标本，仅进行1次收集，每例患者收集30 mL血液，冷藏保存标本，并于短时间内送至检验科检查。

1.2 方法 每份血液标本分别进行常规药敏实验与直接药敏试验检测。

1.2.1 常规药敏试验方法 分别于血平板、巧克力平板及麦康凯平板上放置本研究收集的阳性血液样本并进行接种，孵育环境如下：温度36℃，时间16～22 h，6.0%的CO2，于平板上涂抹菌落，并实施格兰染色，获取检测结果后选择合适的酶。最后鉴定利用Walkaway系统药敏试验。

1.2.2 直接药敏试验方法 直接药敏试验检测及培养均通过BACTEC9240系统，利用该系统培养、检测标本。系统检测出阳性样本后，立即采用消毒注射器抽取阳性样本10 mL，后置入无菌试管中对细菌进行分离操作，1 600 r/min离心6 min，收集上层清液；29 000 r/min离心13 min，去除上清液，通过PBS洗涤，经2次沉淀后重悬。应用革兰氏染色20μL悬液涂片，然后利用显微镜观察。若格兰阳性均呈链状，则第1次药敏试验材料为MH+6%羊血的血瓶本，获取检测结果后，选择合适的酶，后调整菌液浓度至6.0×105cuf/L，然后于NC21综合板上接种，最后开展细菌鉴定及药敏试验。常规菌种，于MH平板上接种，通常滴悬液1～3滴，后利用无菌试纸均匀涂抹，最终置于药敏纸片上。通过2005NCCLSI标准准确判断耐药性及敏感度。

1.3 观察指标 统计不同检测方法菌种检出符合率及药敏试验结果与抗生素敏感度符合率。

1.4 统计学方法 采用SPSS 21.0统计学软件进行数据分析，计数资料以[n（%）]表示，行χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两种检测方法菌种检出符合率 250份样品中，经有效检测共220份阳性样品。直接法检测的革兰阴性球菌及革兰阳性杆菌检出符合率分别为92.00%和96.43%，与常规法比较差异无统计学意义，见表1。

表1 两种检测方法菌种检出符合率比较[n（%）]Table 1 Comparison of the coincidence rate of the two detection methods for the detection of strains[n(%)]

2.2 两种检测方法药敏试验结果与抗生素敏感度符合率比较 直接法检测的革兰阴性球菌、革兰阳性杆菌抗生素敏感度符合率分别为97.44%和98.39%，与常规法比较差异均无统计学意义，见表2。

表2 两种检测方法药敏实验结果与抗生素敏感度符合率比较[n（%）]Table 2 Comparison of the coincidence rate between the results of the two detection methods and the sensitivity of antibiotics[n(%)]

3 讨论

近年来，由于细菌耐药性越来越强，增加了菌血症及败血症等疾病发生率，导致由血液疾病引起的死亡率不断升高[5]。科学、合理、快速的检测方法在临床诊治中具有重要作用[6]。目前，临床主要通过药敏试验方法鉴定血液中的细菌。药敏试验要求严格，且试验条件创造难度大[7]。现阶段，临床使用范围相对较广的药敏试验方法包括抗生素浓度梯度法、稀释法、全自动培养检测仪及纸片扩散法等[8]。本研究中，检测系统为BACTEC9240系统，该系统属于全自动血液培养系统，通过荧光探测技术对培养瓶密封，连续检测瓶内微生物代谢导致的CO2或O2浓度变化[9]，检测微生物正常繁殖状况，其同样适用于快速血液检测和细菌其他标本中真菌、感染及分枝杆菌检测中[10]。

利用BACTEC9240系统开展检测，利用两种实验方法鉴定血培养阳性标本可知，在革兰阴性球菌及革兰阳性杆菌鉴别诊断中具有较高的符合率[11]，此外，在肠杆菌种检测中，也具有较高的检出符合率[12]。本系统除可清楚显示革兰阴性球菌与革兰阳性杆菌，同时具有较高的肠杆菌属敏感性。本研究结果表明，250份样品中，经有效检测共220份阳性样品，直接法检测的革兰阴性球菌及革兰阳性杆菌检出符合率分别为92.00%和96.43%，与常规法比较差异均无统计学意义；直接法检测的革兰阴性球菌、革兰阳性杆菌抗生素敏感度符合率分别为97.44%和98.39%，与常规法比较差异均无统计学意义。根据上述结果分析，两种检测方法具有较高的应用价值。与常规药物检测方法相比，直接药敏实验具有准确率高、操作简单、快捷等特点，通常情况下，直接药敏试验时间大约为10 h，与其他检验相比更短，此外，其为临床诊治提供了重要数据参考，以便更好开展治疗工作，确保良好的治疗效果[13]。

综上所述，常规药敏试验与直接药敏试验均具有较高的临床血液细菌检出率，但与常规药敏试验检测方法相比，直接药敏试验具有操作快捷、简单、准确度高等特点，值得临床推广。